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5 Fonctionnement
5.2 Garnissage de la colonne
Étape
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24
Action
Calculer le volume de colonne (CV) pour le Primer Support 5G sec corres-
pondant à l'échelle de la synthèse. Utiliser les valeurs de ce tableau :
Primer Support5G [g]
2,8
5,6
11,1
Remarque :
Le rapport exact est indiqué dans le fichier de données du Primer Support
5G pour différentes longueurs d'oligonucléotides. Pour un 20-mère (oligonu-
cléotide d'une longueur de 20 bases), il est de 111 mg/ml CV.
Ajouter le poids requis de Primer Support 5G sec à un bécher.
Fabriquer un slurry en ajoutant 1,2 CV d'acétonitrile au bécher, agiter délica-
tement et laisser reposer pendant 2 à 3 minutes pour permettre au Primer
Support de gonfler correctement.
Ajouter le slurry à la colonne, laisser le Primer Support sédimenter pendant
2 à 3 à minutes.
À l'aide d'un stylo, marquer le verre de la colonne à l'endroit où devrait se
trouver l'adaptateur dans la colonne, en se basant sur le CV calculé, ou
utiliser les lignes gravées sur la colonne.
Humidifier l'adaptateur avec de l'éthanol à 50 % à 95 %.
Raccorder un bouchon d'arrêt au bas de la colonne.
Raccorder une tubulure à l'adaptateur et insérer l'autre extrémité de
manière sécurisée dans un récipient de collecte des déchets.
Insérer l'adaptateur. Ajuster l'adaptateur de la colonne à la main, au niveau
qui correspond au volume calculé dans la liste ci-dessous.
S'assurer que l'adaptateur est en position correcte.
Verrouiller l'adaptateur à l'aide du dispositif de verrouillage mécanique.
Raccorder une tubulure d'un diamètre externe de 1/8 po de la vanne 6 au
tube et de la sortie de la colonne à la vanne 7.
Remarque :
Maintenir la tubulure d'un diamètre externe de 1/8 po aussi courte que
possible.
CV [ml]
25
50
100
FineLINE 35 oligo Mode d'emploi 28964957 AB
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