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Principes de fonctionnement
Courbes d'étalonnage
Une courbe d'étalonnage, également appelée courbe de concentration standard, est une méthode qui permet
de déterminer la concentration d'une substance dans un échantillon inconnu en comparant cet échantillon
inconnu à un jeu d'échantillons standard dont la concentration est connue. La courbe d'étalonnage est un
tracé de la réponse de l'instrument (le signal analytique) aux modifications de la concentration de l'analyte
(la substance à mesurer). L'opérateur prépare une série d'étalons sur une plage de concentrations proches de
la concentration attendue de l'analyte dans l'échantillon inconnu.
Les références d'étalonnage sont utilisées pour construire les courbes d'étalonnage. Les lectures incorrectes
ou manquantes de certains des échantillons d'étalonnage peuvent indiquer des problèmes au niveau de la
série analytique. Suivez des méthodes acceptables trouvées dans la documentation publiée et les orientations
des organismes de réglementation pour créer une courbe d'étalonnage. Exemples de bonnes pratiques de
préparation des courbes d'étalonnage :
• Préparer des références d'étalonnage dans une matrice à « blanc » dans laquelle l'analyte doit être mesuré
• Générer une courbe d'étalonnage pour chaque analyte à mesurer
• S'assurer de la couverture de la plage de concentration attendue de l'analyte, y compris pour des échantillons
typiques et atypiques.
• Utiliser six à huit standards pour générer la courbe
Cette liste n'est pas complète et d'autres orientations doivent être utilisées pour déterminer les bonnes pratiques
de développement d'une courbe d'étalonnage pour le laboratoire.
Remarque : Dans certaines procédures analytiques, des références d'étalonnage en un point sont utilisées.
Les étalonnages en un point sont réalisés à l'aide d'une matrice d'échantillon témoin et d'une seule
concentration de l'étalon. La relation entre la réponse de l'instrument et la concentration de l'analyte est
déterminée par la droite créée entre ces deux points. Les méthodes d'acquisition et de traitement doivent
être validées avant d'être acceptées pour leur utilisation prévue.
Équations de régression
Cette section décrit les équations utilisées pour calculer les courbes de régression. Dans les équations suivantes,
x représente la concentration de l'analyte pour les échantillons Standard et y représente l'aire ou l'amplitude
de pic correspondante. Les variables exactes utilisées pour la régression dépendent de l'utilisation ou non d'un
étalon interne et de l'utilisation de l'aire ou de l'amplitude du pic, comme illustré dans le
Tableau 2-2 Variables de régression
Étalon interne
utilisé ?
Oui
Oui
Système SCIEX X500 QTOF
28 / 235
Aire
utilisée ?
Oui
C
Non
C
x
/ C
/ DF
a
is
/ C
/ DF
a
is
Guide de l'utilisateur du système
Tableau
2-2.
y
A
/ A
a
is
H
/ H
a
is
RUO-IDV-05-2334-FR-E
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