Régler Les Paramètres Pour L'acquisition; Acquisition De L'image; Réglage Du Gain; Réglage De La Puissance Laser - Leica SP8 Mode D'emploi

canal à la fois.
3.3 Régler les paramètres pour l'acquisition
Allez dans Acquisition Mode.
Taille de l'image : Choisissez la taille de votre image dans Format (classiquement on fait du 512 x
512 pixels).
En cliquant sur le bouton Optimize xy format, on obtient la dimension en pixels idéale de l'image. Il
ne sert à rien d'avoir un nombre de pixels plus important que le nombre optimal (cf échantillonnage
spatial). Si un zoom est appliqué, il faut alors de nouveau cliquer sur ce bouton afin d'avoir la taille
optimale de l'image.
Vitesse d'acquisition : Plus la vitesse d'acquisition de l'image est lente, meilleur sera le rapport
signal/ bruit. La vitesse habituellement choisie est de 600 Hz.
Moyennage : Si le rapport signal/bruit n'est pas suffisant, on peut faire une moyenne. Avec un
échantillon vivant, le mode ligne est le plus approprié.
Direction : Afin de gagner du temps, acquérir l'image en balayage bidirectionnel en cliquant sur le
bouton Bidirectional z.

3.4 Acquisition de l'image

Pour chaque canal, les réglages doivent être faits afin que l'intensité des pixels les plus brillants soit
la plus proche possible de la saturation sans l'atteindre. Pour cela, il faut jouer sur le gain du
détecteur et la puissance du laser.
Démarrez le scan en cliquant sur Live
apparaissent en bleu et les pixels à zéro sont en vert) en cliquant sur le bouton
gauche de l'image. Afin d'obtenir une bonne image, les pixels les brillants doivent être proches de la
saturation sans l'atteindre. Pour cela, il faut régler le gain du détecteur et la puissance du laser
correspondant.
3.4.1 Réglage du Gain
Faire la même chose pour tous les autres canaux.
Une fois les réglages réalisés, cliquez sur le bouton Start
Plateau technique d'imagerie cellulaire d'Infinity-Purpan
Sophie Allart - sophie.allart@inserm.fr
Pour régler le gain du détecteur, jouez
avec le bouton gauche de la barre de
boutons de réglage. Jusqu'à 100% il n'y a
pas d'ajout de bruit électronique. Pour sélectionner le détecteur à
modifier, cliquez sur l'image correspondante (elle doit être entourée de
pointillés blancs).
3.4.2 Réglage de la puissance laser :
La puissance du laser se règle dans le logiciel. Pour sélectionner le
laser à modifier, il faut sélectionner la séquence correspondante dans
l'onglet Sequential Scan.
– Simon Lachambre –
Tél : 05. 62. 74. 45. 78
05. 31. 54. 79. 01
et se mettre en fausse couleur (les pixels saturés
pour acquérir une image.
simon.lachambre@inserm.fr
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