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7. Tissu affecté par le formol pendant le rinçage ou l'infiltration de paraffine
Ce problème peut survenir si une valve qui fuit permet au formol de s'écouler dans le bain de paraffine.
Contactez l'assistance client pour tester l'appareil si vous rencontrez ce problème.
Une contamination au formol est caractérisée par une nuance bleue dans les noyaux, la perte de détail de la
chromatine, le rétrécissement nucléaire, une éosinophilie variable et un gonflement et/ou rétrécissement
cytoplasmique.
Vous devez d'abord faire fondre les blocs, éliminer l'excès de paraffine puis placer les échantillons dans de
nouvelles cassettes. Ceci minimise la contamination à la paraffine des réactifs de traitement. Ensuite, retraitez
les blocs avec l'une des méthodes indiquées pour le problème 6. Puis, trempez dans une solution de prélèvement
à pH élevé Tris-HCl (par ex. BOND solution de prélèvement Epitope 2) pendant 2 à 12 heures à température
ambiante.
Ce traitement permet d'améliorer les qualités de coloration de HE & HES, les qualités de coupe du tissu et la cohésion
de la coupe. Le détail nucléaire, le gonflement cytoplasmique et la définition ne sont probablement pas améliorés.
8. Tissu sous-traité fixé de manière inadéquate
Une solution possible est d'effectuer un traitement inversé lent du tissu (voir C. Processus lent inversé),
d'appliquer une fixation au formol additionnelle, puis de retraiter en utilisant un programme adapté à la taille et
à la nature de l'échantillon (voir Type d'échantillon et durée d'un protocole à page 162).
Le tissu non fixé ou mal fixé est endommagé par le traitement. L'alcool et les températures élevées produisent
un effet fixateur différent de celui du formaldéhyde. Par conséquent, les blocs ont plus tendance à se durcir et à
rétrécir. S'ils sont associés à un sous-traitement, les blocs peuvent devenir inutilisables.
Protocole de nettoyage inversé rapide
Étape Type de réactif
1
Solvant de nettoyage
2
Éthanol de nettoyage
Durée de traitement :
Protocole de nettoyage inversé lent
Étape Type de réactif
1
Solvant de nettoyage
2
Solvant de nettoyage
3
Éthanol de nettoyage
4
Éthanol de nettoyage
Durée de traitement :
HistoCore PELORIS 3 Manuel d'utilisation Rév A08
Durée (min) Temp. (°C)
12
6
18
Durée (min) Temp. (°C) P/V
60
65
60
65
60
45
60
45
240
© Leica Biosystems Melbourne 2020
P/V
65
Ambiante
55
Ambiante
Ambiante
Ambiante
Ambiante
Ambiante
Agitateur Temps d'égouttage
10
Élevée
10
Élevée
Agitateur Temps d'égouttage
Élevée
Élevée
Élevée
Élevée
Dépannage
10
10
10
10
189
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