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Régler les paramètres pour l'acquisition
Allez dans Acquisition Mode.
Taille de l'image: Choisissez la taille de votre image (classiquement on fait du 512 x 512
pixels).
En cliquant sur le bouton Optimal, on obtient la dimension en pixels idéale de l'image. Il ne
sert à rien d'avoir un nombre de pixels plus important que le nombre optimal (cf
échantillonnage spatial).
Vitesse d'acquisition: Plus la vitesse d'acquisition de l'image est lente, meilleure sera le
rapport signal/ bruit. La vitesse habituellement choisie est de 8.
Moyennage: Si le rapport signal/bruit n'est pas suffisant, on peut faire une moyenne. Avec un
échantillon vivant, le mode ligne est le plus approprié.
Dynamique de l'image: Pour des images destinées à être publiées ou pour être analysées par
la suite (quantification, colocalisation par exemple), l'image doit être acquise en 12 bits (4096
niveaux de gris). Sinon, une acquisition en 8 bits suffit (256 niveaux de gris).
Direction: Afin de gagner du temps, acquérir l'image en balayage bidirectionnel.
Acquisition de l'image
Allez dans Channels
Sélectionnez le canal vert et cliquez sur une unité Airy (1
AU) (1) afin de régler l'ouverture du pinhole de façon
optimale.
Pour chaque canal, mettre le gain (master) à 500. Se mettre
en fausse couleur (dans Channels, range indicator-4) et
démarrer le scan en mode continuous
Régler le gain (2) (entre 500 et 1000) et le laser (3) afin d'être
le plus proche de la saturation sans pour autant avoir des
pixels saturés (qui sont rouges. Les pixels à zéro sont en
bleu). Régler l'Offset de façon à obtenir un mélange de
Plateau technique d'imagerie cellulaire INFINITy-Purpan
Sophie Allart -
sophie.allart@inserm.fr
sur une couleur.
- Simon Lachambre -
Tél : 05. 62. 74. 45. 78
05. 31. 54. 79. 01
simon.lachambre@inserm.fr
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