Table des Matières
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6 Procédure de pré-synthèse
6.2 Préparation des solutions
Réactif
Activateur
Réactif oxydant
Réactif de capping
A
Réactif de capping
B
86
Description
GE recommande d'utiliser du benzylthio-tétrazole (BTT) comme
activateur, à une concentration de 0,3 M. Pour la synthèse de
l'ADN, une concentration de 0,25 M est suffisante.
S'assurer que l'activateur est complètement dissous, puis
ajouter des tamis moléculaires de 3 Å (en quantité suffisante
pour couvrir les filtres) avant de raccorder le flacon à la ligne
marquée 16 sur le panneau d'entrée du réactif du système
ÄKTA oligopilot plus (voir
et des solutions au panneau d'entrée, à la page
Remarque :
•
S'assurer que l'activateur s'est totalement dissous. La disso-
lution de l'activateur prend plus de temps lorsque la satura-
tion est approuvée.
•
Ne pas ajouter de tamis moléculaire tant que l'activateur
n'est pas complètement dissous.
•
L'activateur peut cristalliser dans la solution à des tempéra-
tures inférieures à 18 °C. Dans ce cas, secouer vigoureuse-
ment l'activateur à température ambiante jusqu'à ce qu'il
se liquéfie.
Le réactif oxydant est constitué de 50 mM d'iode (12,7 g de
solution I
pour 1 litre de solution) dans de l'eau/la pyridine
2
dans des proportions de 1:9 (v/v).
Le réactif de capping A est du N-méthylimidazole à 20 % (v/v)
dans de l'acétonitrile. Ce réactif est disponible en tant que so-
lution prête à l'emploi.
Le réactif de capping B est de l'anhydride acétique à 20 % dans
de la sym-collidine ou lutidine à 30 % et de l'acétonitrile à 50 %.
Ce réactif est disponible sous forme de deux solutions prêtes
à l'emploi à mélanger immédiatement avant utilisation.
Section 6.5 Raccordement des réactifs
ÄKTA oligopilot plus Mode d'emploi 28959748 AE
95).
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