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6.7.4
Balayage de spectre unique
Enregistrement d'un spectre de ligne de base
Détecteurs à fluorescence (VC-D50, VC-D51, VF-D50, VF-D51)
Manuel d'utilisation
fonctionnement normal, pour lequel la majorité de la lumière émise est
bloquée par le monochromateur d'émission. Cela peut permettre
d'atteindre une limite de détection supérieure.
Consultez le Fluorescence Method Development Handbook pour un
exemple de développement de méthodes à l'aide du Mode d'ordre zéro.
NOTE
Pour activer le Mode d'ordre zéro dans le logiciel Chromeleon,
configurez la propriété EmWavelength sur ZeroOrder.
Consultez également
2
Roue porte-filtres (détecteurs uniquement) (} page 119)
Lors du balayage d'un seul spectre (Single Spectrum Scan), le
monochromateur d'excitation ou d'émission (ou bien les deux
simultanément), se déplace sur une gamme de longueurs d'onde
définissable pendant que l'intensité des signaux de fluorescence est
mesurée et enregistrée en continu pour chaque longueur d'onde. Cela
vous permet, par exemple, d'enregistrer des spectres afin de déterminer
les longueurs d'onde d'émission et d'excitation optimales. Il existe trois
modes de balayage différents : balayage d'excitation, balayage
d'émission et balayage de synchronisation.
Pour obtenir des conditions stables dans la cellule à écoulement, il est
recommandé d'arrêter le débit de la pompe ou de régler un débit très
lent. Si le balayage peut être effectué pendant l'élution d'un pic et qu'il
est nettement plus rapide que la largeur complète à la moitié du
maximum du pic, le débit de la pompe peut être maintenu à un niveau
constant. Pour obtenir plus d'informations, consultez l'Aide de
Chromeleon.
Un spectre de ligne de base avec les mêmes paramètres peut être
enregistré pour tous les modes de balayage. Le spectre de la ligne de
base est stocké dans le logiciel Chromeleon et automatiquement
soustrait des spectres enregistrés. Le résultat est un spectre différentiel,
c'est-à-dire que l'autofluorescence du solvant utilisé est éliminée. Notez
que Chromeleon affiche un avertissement lorsqu'il manque le spectre de
la ligne de base.
Lorsque les paramètres d'un balayage sont modifiés, le spectre de fond
est automatiquement supprimé et un nouveau spectre doit être
enregistré. Vous pouvez à tout moment supprimer un spectre de ligne
de base à l'aide de la commande ClearBaseLine.
6
•
Utilisation
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