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6
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Utilisation
6.9.3
Détermination de la longueur d'onde d'excitation et de la longueur
d'onde d'émission optimales
Changement de longueur d'onde dans le logiciel Chromeleon
Page 114
Les principaux paramètres à optimiser sont les longueurs d'onde
d'excitation et d'émission. Prenez en considération les principaux
critères suivants pour déterminer la longueur d'onde pour une analyse :
•
Sélectionnez de préférence une longueur d'onde d'excitation située
au niveau de l'absorption maximale des composants de l'échantillon.
•
Évitez les plages de longueurs d'onde pour lesquelles les solvants
absorbent (par exemple, plage inférieure à 220 nm pour le méthanol
et inférieure à 210 nm pour l'acétonitrile). La longueur d'onde
d'excitation sélectionnée doit toujours être supérieure à la
coupure UV du solvant. Pour obtenir des renseignements
complémentaires sur la longueur d'onde de coupure UV des
solvants, reportez-vous à la
UV des solvants
(} page 194).
•
Sélectionnez une longueur d'onde d'émission supérieure d'au moins
20 nm à la longueur d'onde d'excitation.
NOTE Chromeleon 7 prend en charge Acquisition de champ FL pour le
détecteur à fluorescence, ce qui simplifie la détermination des temps de
rétention et des absorptions maximales.
Pour obtenir plus d'informations sur la sélection des longueurs d'onde
optimales, consultez le Fluorescence Method Development Handbook
expédié avec le détecteur.
Thermo Fisher Scientific recommande d'utiliser le mode canal unique
pour enregistrer des données lors du changement de longueur d'onde
entre des pics détectés pour les divers composants de l'échantillon
plutôt que de mesurer simultanément toutes les longueurs d'onde
intéressantes en mode multicanal.
Pour définir les longueurs d'onde de départ pour un canal, utilisez
l'Instrument Method Wizard. Une fois l'assistant fermé, ouvrez la
méthode dans l'Instrument Method Editor. Dans le Vue Module du
détecteur, sous l'onglet Timetable, vous pouvez définir les temps de
changement de longueur d'onde et d'autres paramètres.
Pour obtenir plus de détails, consultez également l'Aide de Chromeleon.
Détecteurs à fluorescence (VC-D50, VC-D51, VF-D50, VF-D51)
section Longueurs d'onde de coupure
Manuel d'utilisation
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