Manuels Connexes pour altona DIAGNOSTICS RealStar PCR Kit 1.0
Sommaire des Matières pour altona DIAGNOSTICS RealStar PCR Kit 1.0
- Page 1 altona DIAGNOSTICS Mode d'emploi RealStar ® Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 01/2017 FR...
- Page 3 6000 (Corbett Research) ® Rotor-Gene Q5/6 plex Platform (QIAGEN) ® CFX96™ Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad) CFX96™ Deep Well Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad) LightCycler 480 Instrument II (Roche) ® 551013 01 2017 altona Diagnostics GmbH • Mörkenstr. 12 • D-22767 Hamburg...
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Page 4: Table Des Matières
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® Sommaire Usage prévu ....................6 Composants du kit ..................6 Conservation ....................6 Matériel requis non fourni ................. 7 Informations générales ................8 Description du produit ................9 Instruments de PCR en temps réel ............11 Mises en garde et précautions .............. - Page 5 RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® 10.2.2 Analyse quantitative ................... 20 Evaluation des performances ..............21 11.1 Sensibilité analytique ................. 21 11.2 Spécificité analytique ................. 22 11.3 Gamme de linéarité ..................24 11.4 Précision ....................25 Limites ....................... 26 Contrôle qualité...
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Page 6: Usage Prévu
® carbonique. Les composants du kit doivent arriver congelés. Si un ou plusieurs composants ne sont pas congelés à réception, ou si l’un des tubes a été endommagé pendant le transport, merci de contacter altona Diagnostics GmbH pour assistance. •... -
Page 7: Matériel Requis Non Fourni
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® • La conservation entre +2°C et +8°C ne doit pas excéder une période de deux heures. • Le Master A et le Master B doivent être conservés à l’abri de la lumière. 4. Matériel requis non fourni •... -
Page 8: Informations Générales
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® 5. Informations générales Pneumocystis jirovecii est l'agent responsable de la Pneumonie à Pneumocystis (PCP), c’est une des infections opportunistes les plus fréquentes et sévères chez les individus immunodéprimés. Les symptômes de la PCP comprennent une dyspnée, une toux non productive et de la fièvre. -
Page 9: Description Du Produit
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® Puisque, Pneumocystisne peut pas être cultivé, le diagnostic repose traditionnellement sur la visualisation de l'organisme dans les échantillons respiratoires, comprenant le crachat, le LBA, ou le tissu pulmonaire, ou sur la détection spécifique de l‘ADN de Pneumocystis en utilisant des tests de diagnostics moléculaires plus sensibles. - Page 10 RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® • L’amplification par PCR de l’ADN et du contrôle interne • La détection simultanée des amplicons de PCR par des sondes marquées par un fluorophore Le kit RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 est composé de: ®...
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Page 11: Instruments De Pcr En Temps Réel
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® 6.1 Instruments de PCR en temps réel Le kit RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 a été développé et validé pour ® être utilisé avec les instruments de PCR en temps réel suivants: •... -
Page 12: Mode D'emploi
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® • Eviter les contaminations microbiennes et nucléaires (par ADNase/ARNase) de l’échantillon et des composants du kit. • Toujours utiliser des pipettes à cônes jetables avec filtre, non contaminées par de l’ADNase et de l’ARNase. •... - Page 13 RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® La qualité de l'ADN extrait a un impact significatif sur la performance de l’ensemble du test. Il est important de s’assurer que le système d’extraction des acides nucléiques utilisé est compatible avec la technologie de PCR en temps réel. Les kits et systèmes suivants sont compatibles pour l'extraction des acides nucléiques: •...
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Page 14: Préparation Du Mastermix
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® 8.2 Préparation du Mastermix Tous les réactifs doivent être complètement décongelés, homogénéisés (par pipetage ou léger vortexage) et brièvement centrifugés avant utilisation. Le kit RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 contient un contrôle interne ®... -
Page 15: Préparation De La Réaction
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® l’échantillon, le Mastermix doit être préparé selon le schéma de pipetage suivant: Nombre de réactions (rxns) Master A 5 µL 60 µL Master B 15 µL 180 µL Volume de Mastermix 20 µL 240 µL ATTENTION Si le contrôle interne a été... -
Page 16: Programmation Des Instruments De Pcr En Temps Réel
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® ► S'assurer qu'au moins un contrôle positif (QS) et un contrôle négatif sont utilisés par essai. ► Pour une quantification, tous les étalons (QS1-4) doivent être utilisés. ► Homogénéiser avec soin les échantillons et les contrôles avec le Mastermix par pipetage. -
Page 17: Marqueurs De Fluorescence (Fluorophores)
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® 9.2 Marqueurs de fluorescence (fluorophores) ► Définir les marqueurs de fluorescence (fluorophores): Nom du Fluorophore Désactivateur Cible marqueur (Reporter) (Quencher) ADN spécifique du P. jirovecii P. jirovecii FAM™ (aucun) Internal Control (contrôle interne) JOE™... -
Page 18: Validation Des Tests De Diagnostic
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® 10.1 Validation des tests de diagnostic 10.1.1 Validité des tests de diagnostic (qualitatif) Un test de diagnostic qualitatif est valide, si les valeurs suivantes des contrôles sont obtenues: Canal de détection Nom du Contrôle FAM™... -
Page 19: Invalidité Des Tests De Diagnostic (Quantitatif)
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® Paramètres de contrôle Valeur valide R carré (R ≥ 0,98 NOTE Tous les instruments de PCR en temps réel ne présentent pas la valeur R carré (R ). Pour plus d’information, merci de vous référer aux manuels d’utilisation des instruments respectifs. -
Page 20: Analyse Quantitative
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® 10.2.2 Analyse quantitative Le kit RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 fournit quatre étalons (QS). ® Afin de générer une courbe d’étalonnage pour les analyses quantitatives, les QS doivent être définis comme des standards de concentrations définis (Chapitre 6. Description du Produit). -
Page 21: Evaluation Des Performances
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® NOTE La concentration de "l'échantillon" est affichée en copies/µL et se réfère à la concentration dans l´éluat. Afin de déterminer la charge fongique de l’échantillon d’origine, la formule suivante doit être appliquée: Volume (Eluat) [µL] · Fongique Virale (Eluat) [copie/µL] Charge Fongique (échantillon) [copie/mL] = Volume d'échantillon [mL] 11. -
Page 22: Spécificité Analytique
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® Tableau 1: Résultats de PCR utilisés pour le calcul de la sensibilité analytique concernant la détection de l'ADN spécifique du P. jirovecii [C] initiale Nombre de Taux de réussite Nombre de Positifs [copies/µL] répétitions 31,622 10,000... - Page 23 RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® liés au P. jirovecii et/ou susceptibles de causer des symptômes similaires. Le kit RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 n’a présenté aucune réaction ® croisée avec l’un des pathogènes spécifiés ci-dessous: • Cytomégalovirus •...
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Page 24: Gamme De Linéarité
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® 11.3 Gamme de linéarité La gamme de linéarité du kit RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 a été ® évaluée par l’analyse d’une série de dilutions logarithmiques d’ADN spécifique du P. jirovecii en utilisant des concentrations variant de 10 copies/µL à... -
Page 25: Précision
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® 11.4 Précision Les données de précision du kit RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ont ® été déterminées comme étant la variabilité intra-essai (variabilité au sein d’une expérience), la variabilité inter-essai (variabilité entre différentes expériences) et la variabilité... -
Page 26: Limites
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® 12. Limites • Une stricte conformité aux instructions d’utilisation est nécessaire afin d’obtenir les meilleurs résultats. • L’utilisation de ce produit est limitée au personnel qualifié et formé aux techniques de PCR en temps réel et aux procédures de diagnostic in vitro. •... -
Page 27: Contrôle Qualité
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® 13. Contrôle qualité Conformément au système de management de la qualité d'altona Diagnostics GmbH, certifié ISO EN 13485, chaque lot du RealStar Pneumocystis jirovecii ® PCR Kit 1.0 est testé selon des spécifications prédéfinies afin de garantir une qualité... - Page 28 Produit non homologué pour la vente par Santé Canada et n’ayant pas fait l’objet d’une notification (510(k)) ou d’une approbation (PMA) de pré-commercialisation par la FDA. Produit distribué dans certains pays uniquement. © 2017 altona Diagnostics GmbH; tous droits réservés.
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Page 29: Explications Des Symboles
RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® 17. Explications des symboles Symbol Explication Dispositif médical de diagnostic In vitro Numéro de lot Couleur du bouchon Référence produit Contenu Nombre Composant Code article international Lire les instructions d’utilisation Contient la quantité suffisante pour réaliser "n" tests (rxns) Limites de température À... - Page 30 RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® Notes:...
- Page 31 RealStar Pneumocystis jirovecii PCR Kit 1.0 ® Notes:...
- Page 32 Diagnostics GmbH Mörkenstr. 12 22767 Hamburg, Germany phone +49 40 548 0676 0 +49 40 548 0676 10 e-mail info@altona - diagnostics.com www.altona - diagnostics.com...