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L'utilisation de sondes associées à des fluorophores différents permet la détection
en parallèle de l'ADN spécifique de tcdA et tcdB, ainsi que la détection du contrôle
interne dans les canaux correspondants de l'instrument PCR en temps réel.
Le test consiste en deux processus réalisés dans un même tube réactionnel :
•
L'amplification par PCR de l'ADN cible et contrôle interne
•
La détection simultanée des amplicons de PCR par des sondes marquées
par un fluorophore
The RealStar
Clostridium difficile PCR Kit 2.0 consists of:
®
•
Master A
•
Master B
•
Internal Control
•
Positive Control
•
Water (PCR grade)
Les réactifs du Master A et du Master B contiennent tous les composants nécessaires
(tampon PCR, ADN Polymérase, sel de magnésium, amorces et sondes) afin de
réaliser l'amplification par PCR et la détection de la cible ADN spécifique de tcdA,
de la cible ADN spécifique de tcdB ainsi que du contrôle interne en une seule étape
de réaction.
6.1 Instruments de PCR en temps réel
Le kit RealStar
Clostridium difficile PCR Kit 2.0 a été développé et validé pour être
®
utilisé avec les instruments de PCR en temps réel suivants :
•
Mx 3005P™ QPCR System (Stratagene)
•
VERSANT
®
•
ABI Prism
7500 SDS (Applied Biosystems)
®
•
ABI Prism
7500 Fast SDS (Applied Biosystems)
®
10
RealStar
Clostridium difficile PCR Kit 2.0
®
kPCR Molecular System AD (Siemens Healthcare Diagnostics)
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