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Chapitre 3 Préparation des réactifs
Introduction
Flow Cell HiSeq X
Flow Cell HiSeq 3000/4000
Flow Cell HiSeq à débit élevé
Flow Cell HiSeq Rapid
Introduction
Les instructions de préparation des réactifs dépendent de la trousse de réactifs que vous utilisez.
Les instructions sont organisées par type de Flow Cell et portent sur les Flow Cell HiSeq X, HiSeq 3000/4000,
HiSeq à débit élevé et HiSeq rapide.
Après la préparation, les réactifs de génération d'amplifiats sont prêts à être chargés sur l'instrument cBot à
la demande du logiciel.
Pratiques exemplaires
Portez une nouvelle paire de gants lors de la préparation des réactifs de génération d'amplifiats.
u
Ne retirez pas le couvercle de protection en plastique transparent de la plaque des réactifs tant que vous
u
n'êtes pas prêt à charger les réactifs sur l'instrument cBot. Veillez à ne jamais perforer les opercules en
aluminium.
Tenez les plaques de réactifs contenant des barrettes de huit tubes par la base de la plaque, afin
u
d'éviter de déloger les tubes de réactifs. Vérifiez que les tubes sont bien en place dans la plaque des
réactifs avant d'avoir mélangé les réactifs par agitateur vortex ou retourné la plaque des réactifs et après
ces actions. Des tubes mobiles peuvent endommager le collecteur de l'instrument cBot.
Pour la génération d'amplifiats sur une Flow Cell HiSeq X ou HiSeq 3000/4000, préparez toujours du
u
NaOH nouvellement dilué pour dénaturer les librairies. Cette étape est essentielle au processus de
dénaturation. Pour éviter les petites erreurs de pipetage, préparez au moins 1 ml de NaOH 0,1 N
nouvellement dilué.
Flow Cell HiSeq X
Préparez la Flow Cell structurée HiSeq X, puis les réactifs de génération d'amplifiats. Pour préparer les
réactifs de génération d'amplifiats, décongelez la plaque des réactifs cBot et préparez le mélange
principal ExAmp.
Si vous utilisez la trousse 10-pack, préparez quatre Flow Cell et décongelez quatre plaques de réactifs cBot.
Veillez à ce que quatre instruments cBot soient disponibles. Les réactifs ne peuvent pas être stockés après
la préparation.
À propos des réactifs
Les réactifs ExAmp sont visqueux, en particulier EPX2 et EPX3. Aspirez et distribuez les réactifs
u
lentement pour assurer la précision du pipetage.
Le réactif EPX3 ne bouge pas lorsqu'il est inversé en raison de sa viscosité.
u
N'agitez jamais les réactifs ExAmp et ne les recongelez pas après les avoir décongelés.
u
Le mélange principal ExAmp peut être trouble, ce qui est normal. Si la solution se sépare en une partie
u
trouble et une partie transparente, pipettez-la lentement pour la mélanger.
Document nº 15006165 v05 FRA
Destiné à la recherche uniquement.
Ne pas utiliser dans le cadre d'examens diagnostiques.
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