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7 Dépannage
Transfert de bandes inégales
Problème
Transfert de bandes inégales
Liaison inefficace à la membrane
Élément
Paramètres chimiques
Paramètres des membranes
48
Solution
Le papier de transfert et la membrane doivent
être de la même taille que le gel ou d'une dimen-
sion inférieure de 1 à 2 mm. Les papiers de trans-
fert et membranes de grande taille créent un
passage électrique qui permet au courant de
contourner la solution de gel.
La vitesse de transfert des protéines dépend de
la taille et de la charge nette de ces dernières.
Fonction
Préparer le tampon de transfert pour protéines
sans SDS. (Le SDS peut améliorer l'efficacité du
transfert mais risque de créer des interférences
lors de la liaison des protéines à une membrane
en PVDF.)
Vérifier la quantité optimale de méthanol
requise pour le type de membrane, puis la solu-
tion tampon. Ajouter du méthanol à 10 % à 20 %
au tampon de transfert pour améliorer la liaison
avec la nitrocellulose.
Porter des gants lors de la manipulation des
membranes.
Stocker les membranes à température ambiante
et à l'écart de la lumière directe du soleil pour les
maintenir activées.
Vérifier la durée de conservation d'une
membrane en nitrocellulose ; remplacer cette
dernière si nécessaire.
Utiliser une membrane présentant une taille de
pore inférieure (0.10 à 0.20 µm) si les protéines
passent à travers la membrane, ou utiliser un
autre type de membrane.
SEMIPHOR TRANSPHOR UNIT series Mode d'emploi 29281777 AB
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