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Guide du système cBot 2
Type de librairie
ADN sans PCR TruSeq
ADN Flex Nextera
TruSeq Nano DNA
Nextera Rapid Capture Exome
ARN total à brins TruSeq
ARNm à brins TruSeq
2
[Facultatif]
Préparez des librairies non dénaturées en y ajoutant une substance de contrôle PhiX d'Illumina
non dénaturée dans un rapport de 1 %.
Type de librairie
ADN sans PCR TruSeq
ADN Flex Nextera
TruSeq Nano DNA
Nextera Rapid Capture Exome
ARN total à brins TruSeq
ARNm à brins TruSeq
3
Numérotez les tubes d'une barrette de huit tubes :
Pour générer des amplifiats avec suivi des échantillons : étiquetez les tubes du nº 8 au nº 1 en partant
u
de l'extrémité où se trouve la clé.
Pour générer des amplifiats sans suivi des échantillons : étiquetez les tubes du nº 1 au nº 8.
u
4
Dénaturez la librairie dans la barrette de huit tubes comme suit :
a
Ajoutez 5 µl de librairie non dénaturée au fond de chaque puits.
b Ajoutez 5 µl de NaOH 0,1 N nouvellement dilué. Pipettez lentement pour mélanger.
c
Incubez à température ambiante pendant 8 minutes.
d Ajoutez 5 µl de Tris-HCl 200 mmol, pH 8,0. Pipettez lentement pour mélanger.
5
Réservez sur la glace pendant 30 minutes maximum, jusqu'à ce que vous soyez prêt à ajouter le mélange
principal ExAmp.
Préparation de la plaque des réactifs cBot
1
Inversez pour mélanger.
2
Agitez pour déloger les éventuelles bulles d'air piégées.
3
Tapotez sur une surface dure pour recueillir les gouttelettes de réactif. Vous pouvez également passer la
plaque à la centrifugeuse à impulsions.
4
Réservez sur de la glace.
Document nº 15065681 v05 FRA Support nº 20015507
Destiné à la recherche uniquement.
Ne pas utiliser dans le cadre d'examens diagnostiques.
Dilution
Diluez à 1 à 2 nmol dans le RSB.
Diluez à 2 à 3 nmol dans le RSB.
Diluez à 2 à 3 nmol dans le RSB.
Substance de contrôle
Ajoutez 5 µl de contrôle PhiX de 100 à 200 pmol à 45 µl d'une librairie de
1 à 2 nmol.
Diluez à 2 à 3 nmol dans le RSB.
Ajoutez 5 µl de contrôle PhiX de 200 à 300 pmol à 45 µl d'une librairie de
2 à 3 nmol.
19
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