Table des Matières
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7.7
Validation et étalonnage des longueurs d'onde
À quel moment exécuter cette opération ?
Préparatifs
Détecteur de longueur d'onde variables (VC-D40, VF-D40)
Manuel d'utilisation
Un filtre en verre à l'oxyde d'holmium permet de valider l'exactitude des
longueurs d'onde. Il est possible de placer le filtre dans le trajet
lumineux devant la fente d'entrée afin de valider les longueurs d'onde.
Le détecteur détermine les longueurs d'onde de plusieurs pics
d'absorption dans le spectre résultant et les compare aux valeurs
nominales d'oxyde d'holmium enregistrées dans le microprogramme du
détecteur.
Il est possible de valider toutes les configurations de lampe (les deux
lampes allumées, seule la lampe à UV allumée et — mais la moins
favorable — seule la lampe à VIS allumée, si disponible).
L'exactitude est contrôlée pour les longueurs d'onde mentionnées dans
la déclaration de conformité du filtre en verre à l'oxyde d'holmium. Pour
obtenir des renseignements complémentaires sur cette déclaration,
reportez-vous à la section
Il est également possible de réaliser une validation des longueurs d'onde
à l'aide d'un étalon externe, tel qu'une solution de caféine. Dans ce cas-
là, une exactitude de ± 1 nm peut être obtenue.
Une validation des longueurs d'onde est recommandée dans les
situations suivantes :
•
Après le remplacement de la cellule à écoulement
•
Après le remplacement d'une lampe
Avant de commencer la validation des longueurs d'onde, respectez les
consignes suivantes :
•
Laissez la cellule à écoulement se réchauffer pendant 5 minutes.
•
Assurez-vous que la ligne de base est suffisamment stable. Une
instabilité de la ligne de base peut par exemple être observée si la
composition du solvant a été modifiée ou si des bulles d'air sont
présentes dans le trajet lumineux.
•
Veillez à ce que le solvant qui passe à travers la cellule à écoulement
n'ait pas une absorption élevée pour la plage de longueurs d'onde
du filtre en verre en oxyde d'holmium qui doit être vérifiée.
Ce problème peut notamment survenir si la cellule à écoulement
contient un mélange comportant 96 % d'hexane et 4 % d'acétate
d'éthyle. Thermo Fisher Scientific recommande d'utiliser de l'eau
dégazée de qualité LC/MS.
7
•
Maintenance et entretien
Conformité aux normes NIST
(} page 175).
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Dépannage
