Gel Recettes - Hoefer SE400 Manuel De L'utilisateur

Gel recettes

Les recettes de gel Laemmli sont pour 30 ml d'une solution de concentration unique (assez
pour un 1,5 de 18 mm × 16 cm de gel). Sous forme de tableau sont des ingrédients et des
volumes pour des gels pores relativement grands (7,5 à 10% de la plage T) ainsi que les
petites gels pores (de 12,5 à 15% de la plage T). Un gel à 4% d'empilage est commun. La
recette est dégradé linéaire de 100 ml de solution. Le volume total nécessaire dépend du
nombre de suffrages gels et de l'épaisseur du gel; ajuster si nécessaire. Tous les gels sont
réticulées avec 2,6% C.
Tableau 5. Laemmli recettes de gel (par une solution à 30 ml de gel résoudre, 5 ml de solution
de gel d'empilement)
Stock de l'acrylamide (Solution #1) 7,5 ml
1,5 M TrisCl, pH 8,8 Solution #2)
0,5 M TrisCl, pH 6,8 (Solution #3)
10% SDS (Solution #4)
Désionisée H O
2
10% APS (Solution #5)
TEMED
Volume final
Pour les gels de gradient linéaire, utilisez des volumes égaux de% basse et haute des
solutions% d'acrylamide. APS moins est ajouté à prolonger le temps de polymérisation,
et moins encore est ajouté à la solution T supérieur% pour permettre la polymérisation
de se produire à partir du haut vers le bas. Dans notre expérience avec les concentrations
dans l'exemple ci-dessous gradient 10-20%, dix sandwichs de gel peut être coulé dans un
lanceur multiple gel à un débit de 5-10 ml / min.
Tableau 6. Linéaires recettes de gel de gradient (par 100 ml de solution)
Stock de l'acrylamide (Solution #1)
Saccharose
1,5 M TrisCl, pH 8,8 (Solution #2)
10% SDS (Solution #4)
Désionisée H O
2
10% APS (Solution #5)
TEMED
gel de résolution
7,5% 10%
10 ml
7,5 ml 7,5 ml
0,3 ml 0,3 ml
14,6 ml 12,1 ml
150 µl 150 µl
10 µl 10 µl
30,0 30,0 ml
10% T
33,30 ml
25,00 ml
1,00 ml
à 100,00 ml
0,300 ml
0,036 ml
12,5%
12,5 ml 15 ml
7,5 ml 7,5 ml
0,3 ml 0,3 ml
9,6 ml 7,1 ml
150 µl 150 µl
10 µl 10 µl
30,0 ml 30,0 ml
—
empilement de gel
15% 4%
0,67 ml
1,25 ml
0,05 ml
3,00 ml
25 µl
2,5 µl
5,0 ml
20% T
66,70 ml
15,00 g
25,00 ml
1,00 ml
à 100,00 ml
0,060 ml
0,036 ml
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