Table des Matières
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Avant de commencer:
1. L aver tous les composants
avec une solution diluée de
détergent de laboratoire et
bien rincer.
2. N iveau de l'unité en plaçant
le niveau à bulle sur la plate-
forme en cours d'exécution
et en ajustant les pieds de
nivellement.
Volume 3 mm d'épaisseur gels
taille du
bac (cm)
agarose (ml)
15 × 10
15 × 15
15 × 20
Attention! Le bromure
d'éthidium est un mutagène
connu. Toujours porter des gants
lors de la manipulation.
Mode d'emploi
Gels d'agarose sont d'abord jeté dans le kit de
coulage de gel, et les échantillons sont ensuite
chargés dans les puits et séparés par électropho-
rèse. Le bromure de colorant fluorescent éthidium
peut être ajouté à la mémoire tampon de gel
ou électrophorèse ou les deux afin de suivre les
progrès de séparation. À la fin de l'électrophorèse,
le gel peut être teinté et photographié, épongez
transférés, ou séchée pour autoradiographie.
Couler le gel
Préparer les solutions
1
Préparer environ 1,3 litres de tampon. À 100 ml de
tampon est nécessaire pour le gel et 1,2 litres pour la
chambre tampon. Reportez-vous à la page 10 pour les
recettes de trois tampons couramment utilisés électro-
phorétiques en cours d'exécution.
2
Préparer le tampon de chargement de l'échantillon.
Reportez-vous à la page 12 pour une recette et la
capacité de volume sous forme de tableaux pour
45
chaque taille de peigne.
68
3
90
Préparer une solution d'agarose(s).
Dissoudre l'agarose dans la gestion de mémoire
tampon, la chaleur selon les instructions accompa-
gnant l'agarose, et laissez la solution refroidir à 50 °C
avant de verser dans le bac en cours d'exécution.
Facultatif: Ajouter 0,5 µg/ml de bromure d'éthidium
à la solution de gel, afin de faciliter l'observation des
progrès de séparation pendant l'électrophorèse.
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p3
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