► Si le contrôle interne est utilisé comme contrôle de préparation de l'échantillon,
et d'inhibition de la PCR, le contrôle interne doit être ajouté au moment de la
procédure d'extraction des acides nucléiques.
► Quelque soit la méthode ou le système utilisé pour l'extraction des acides
nucléiques, le contrôle interne ne doit jamais être ajouté directement
à l'échantillon. Le contrôle interne doit toujours être ajouté au mélange
échantillon/ tampon de lyse. Le volume du contrôle interne à ajouter dépend
toujours et uniquement du volume d'élution, dont il représente 10%. Par
exemple si les acides nucléiques doivent être élués dans 60 µL de tampon
d'élution ou d'eau, 6 µL de contrôle interne par échantillon doivent être ajoutés
au mélange échantillon/tampon de lyse.
► Si le contrôle interne a été ajouté pendant la phase de préparation de
l'échantillon, le Mastermix doit être préparé selon le schéma de pipetage
suivant:
Nombre de réactions (rxns)
Master A
Master B
Volume de Mastermix
ATTENTION
Si le contrôle interne a été ajouté pendant la phase de préparation
de l'échantillon, au moins le contrôle négatif doit inclure le contrôle
interne.
ATTENTION
Ne jamais ajouter le contrôle interne directement à l'échantillon.
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RealStar
Malaria PCR Kit 1.0
®
1
12
5 µL
60 µL
15 µL
180 µL
20 µL
240 µL