Table des Matières
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1 Spectrophotomètres
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1.1
Photométrie
Lorsqu'un faisceau lumineux traverse une solu-
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tion colorée, ce faisceau perd de son intensité.
En d'autres termes, une partie de la lumière est
absorbée par la solution. L'absorption s'effectue
à certaines longueurs d'onde, selon la substance
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en question.
Pour sélectionner la longueur d'onde dans le
spectre total d'une lampe halogène-tungstène
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(domaine VIS), d'une lampe deutérium (domaine
UV) ou d'une lampe xénon, on utilise des mo-
nochromateurs (par ex. filtre d'interférences à
bande étroite, grille).
6
7
8
9
10
l
0
11
12
13
14
15
16
8
l
c
d
L'intensité de l'absorption peut être représentée
en utilisant la transmission T (ou bien T en %).
T = I/I
0
I
= intensité initiale de la lumière
0
I
= intensité de la lumière transmise
Si la lumière n'est pas du tout absorbée par
la solution, cette solution a une transmission
de 100 % ; si la lumière est complètement
absorbée par la solution, la transmission
est de 0 %.
La mesure généralement utilisée pour
l'absorption de la lumière est l'absorbance (A),
étant donné que celle-ci est en corrélation
directe avec la concentration de la substance
absorbante. La relation suivante existe entre
l'absorbance et la transmission :
A = –log T
Des expériences réalisées par BOUGUER
(1698–1758) et par LAMBERT (1728–1777) ont
montré que l'absorbance dépend de l'épaisseur
de solution traversée dans la cuve. La relation
existant entre l'absorbance et la concentration
de l'analyte concerné fut découverte par BEER
(1825–1863). La combinaison de ces deux
lois naturelles est à l'origine de la loi de Beer-
Lambert, pouvant être décrite sous forme de
l'équation suivante :
A = ε
· c · d
λ
ε
= coefficient d'extinction molaire, en l/mol × cm
λ
d
= longueur du trajet optique de la cuve, en cm
c
= Concentration de l'analyte, en mol/l
Version 3.0 – 04/2021
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