Table des Matières
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Remarque: Stacking résolution
gel est optimale quand
on le verse juste avant
l'électrophorèse.
3.4 La préparation des échantillons et le
chargement
1
Si les puits sont déjà en place, passez à l'étape 2.
Le cas échéant, lancer le gel d'empilement dans l'unité.
Calculer le volume de gel d'empilement monomère
solution: mesurer la distance, en cm, à partir du
haut du gel se résoudre à l'encoche de la plaque
d'alumine. (Cela devrait être d'au moins 2 cm - plus
si la profondeur de l'échantillon dans le puits est
anormalement élevé.) Multipliez cette distance par la
largeur de gel (8,3 cm) et l'épaisseur du gel (cm). Ce
produit est le volume requis en ml.
Désaérer la solution monomère gel d'empilement,
ajouter de catalyseur et un initiateur et verser. Utiliser
une pipette pour fournir la solution dans un coin de la
plaque, en prenant soin de ne pas piéger les bulles.
Insérer un peigne (à un léger angle pour empêcher
l'air de piégeage) dans le sandwich, permettant aux
côtés peigne à reposer sur les entretoises.
2
Préparer l'échantillon. Augmenter la densité échantil-
lon de liquide avec 10% de glycérol ou de saccha-
rose. Ajouter un colorant de suivi comme le bleu ou
rouge de bromophénol phénol.
Pour les gels de protéines de la SDD, utilisez un
tampon de traitement 2X pour dénaturer les deux
échantillons liquides et secs dans un tube à essai.
Pour des solutions de protéines liquides, ajouter un
volume égal de tampon 2X. Pour sécher les échan-
tillons de protéines, ajouter des volumes égaux de
tampon et ddH
O pour atteindre la concentration
2
souhaitée. Chauffer le tube dans l'eau bouillante
pendant 90 secondes, puis le refroidir dans la glace
jusqu'au moment de servir. Échantillons traités
peuvent être conservés congelés pour les courses à
venir. (Conserver à -40 °C à -80 °C.)
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