7. Essai de fertilité sur milieux de culture
L'essai de fertilité sur milieux de culture,
tel qu'il est décrit dans la pharmacopée
harmonisée (USP <61>, EP 2.6.12, JP 4.05
partie 1), peut être réalisé avec l'accessoire
d'essai de fertilité (Réf. MMRECVERY), un
entonnoir Milliflex Oasis
Cet accessoire permet d'obtenir une bonne
distribution de l'inoculum et comporte un
couvercle pour fermer le milieu gélosé.
La présente section décrit l'utilisation de cet
accessoire :
• Obtenir et préparer les cultures
microbiennes souhaitées selon les
procédures normalisées internes ou les
recommandations de la pharmacopée.
Les concentrations doivent être égales ou
inférieures à 100 unités formant colonies
(UFC) par échantillon.
• Placer les milieux gélosés sur le plan de
travail.
• Placer un plateau d'entonnoirs Milliflex
Oasis
sans membrane (Réf. MMRECVERY)
®
dans la zone de travail.
• Retirer le couvercle du milieu gélosé.
• Retirer le support de l'entonnoir.
• Placer l'entonnoir sur le milieu gélosé.
sans membrane.
®
• S'assurer de bien pousser fermement
sur l'entonnoir, d'un mouvement vertical,
contre le milieu gélosé.
• Ôter l'entonnoir en le pinçant d'une main
tout en maintenant la base de l'autre
main.
• Incliner le couvercle de l'entonnoir sur le
côté pour le retirer et le stocker sur le plan
de travail. Jeter l'entonnoir non utilisé.
• Distribuer l'échantillon à inoculer sur la
surface du milieu gélosé et utiliser un outil
stérile pour répartir l'échantillon sur le
milieu.
Remarque : il est recommandé de ne pas
répartir plus de 50 µl sur le milieu gélosé.
Par souci d'uniformité, un même volume doit
être réparti sur la boîte de Petri témoin.
• Couvrir le milieu gélosé inoculé à l'aide du
couvercle de l'entonnoir.
• Incuber le milieu gélosé à la température
et pendant la durée requises.
Remarque : incuber le milieu gélosé avec
le couvercle vers le bas.
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