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où dC/dt = taux de variation de concentration (mol/litre), L = longueur de trajet de
cuve (normalement 1 cm) et E = pouvoir d'absorption molaire (coefficient d'extinction
molaire) du composé mesuré (pour NADH, E = 6300 litres/mol/cm).
Le taux de variation de concentration peut ensuite être utilisé pour calculer l'activité
enzymatique, qui est définie ainsi:
Activité enzymatique = (dC/dt) x (Vt/Vs)
où Vt = volume total du mélange de réaction et Vs = volume de l'échantillon.
Il existe deux unités acceptées internationalement pour l'activité enzymatique:
1)
Unité internationale d'activité enzymatique, U ou IU, définie comme la quantité
d'activité enzymatique qui va convertir 1 micromole de substrat par minute à
25°C.
2)
Katal, kat, défini comme la quantité d'enzyme qui va convertir 1 mole de substrat
par seconde:
1 IU = 1,67 x 10
Le katal n'est pas souvent utilisé bien qu'il s'agisse d'une unité SI reconnue.
Étant donné que nous avons défini nos calculs comme le taux de variation de
concentration (mol/litre), les résultats sont donc présentés comme activité par volume
unitaire, IU/litre ou kat/litre.
Afin de simplifier le calcul de l'activité enzymatique, les variables telles que le
pouvoir d'absorption molaire et le volume de l'échantillon peuvent être combinées
pour produire un facteur de conversion, étant donné que, en considérant les
équations ci-dessus, l'activité enzymatique est proportionnelle à dA/dt. Les variables,
dans les unités correctes lorsqu'on travaille en IU/litre, sont données dans l'équation
suivante:
6
Facteur = Vt.10
/E.L.Vs
où Vt= volume de réaction total (ml), Vs= volume d'échantillons (ml), E= pouvoir
d'absorption molaire (L/mol/cm), L= longueur de trajet (normalement 1 cm).
Le facteur possède les unités µmol/L
Par exemple, dans la réaction enzymatique alanine-transaminase ci-dessus, si nous
avons 0,2 ml d'échantillon test dans un volume de réaction total de 2,20 ml, le facteur
de conversion est calculé comme suit:
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Numéro 04 - 09/2002
-6
kat
1 kat = 6 x 10
Français
7
IU
59
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