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également être obtenu pour l'inspection visuelle de l'intégrité sur la plage de 200 –
350 nm.
Rapport d'absorbance = Abs260 / Abs280
ADNc et PCR étiquetés avec des sondes fluorescentes peuvent être balayés jusqu'à
850 nm afin que les deux pics puissent être utilisés pour contrôler l'efficacité de
l'étiquetage.
La correction du bruit de fond à une longueur d'onde totalement séparée des pics des
acides nucléiques et des protéines à 260 et 280 nm, respectivement, est quelques fois
utilisée pour compenser les effets de l'absorbance de fond. La longueur d'onde
utilisée est 320 nm et elle peut compenser les effets de turbidité, de la solution
tampon d'absorbance élevée et de l'utilisation de cuves à ouverture réduite. Si votre
laboratoire n'a pas utilisé, auparavant, la correction du bruit de fond, réglez cette
option sur non.
Concentration = (Abs260 – Abs320) * Facteur
Rapport d'absorbance = (Abs260 – Abs 320) / (Abs280 – Abs 320)
Le spectrophotomètre calcule la concentration, affiche le rapport 260/280 et
compense la dilution de l'échantillon. Si vous désirez utiliser d'autres longueurs
d'onde, par exemple si le maximum de pic est à 257 nm ou avec une correction de bruit
de fond de 350 nm, utilisez les modes de balayage nucléique ou de rapport
d'absorbance.
Utilisation de la cuve à ultramicrovolume de 7 µl
•
Si vous utilisez cette cuve, veuillez noter qu'elle possède un trajet optique de
5mm et que ces modes partent du principe qu'une cuve d'un trajet optique de 10
mm est utilisée.
•
Veillez à ce que la cuve soit remplie correctement en l'observant à la lumière à
l'aide de la visionneuse fournie avec la cuve; ceci permet d'éviter que le
ménisque liquide soit dans le faisceau lumineux et la génération de résultats non
reproductibles.
•
La compensation du bruit de fond à 320 nm est utile lorsque vous utilisez des
cuves à ouverture restreinte comme celle-ci
ADN, ARN, Oligo
•
Choisissez si la correction de bruit de fond à 320 nm est exigée en utilisant 4
•
Entrez le facteur de dilution d'échantillon
•
Si oligo
•
Entrez le facteur de conversion s'il est connu, la valeur par défaut est 33
µg/ml. Le facteur peut être calculé à partir d'une séquence de bases connue
si la concentration est connue (voir Calcul de Tm).
•
Entrez le temps d'intégration en utilisant 4
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Numéro 04 - 09/2002
Français
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