Séparation des frottis ou perte de cellules
Causes possibles des pertes de frottis à la surface des lames au cours d'un cycle de coloration :
•
Fixation inadéquate
Frottis humides
•
•
Frottis épais
Lames sales
•
Sous-décoloration
Une décoloration insuffisante des spécimens entraînera une teinte Gram positive excessive ou
partielle des bactéries Gram négatives du frottis, du fait de l'élimination incomplète du complexe
iode-cristal violet. Les causes possibles de sous décoloration sont les suivantes:
•
Réglage incorrect du décolorant
Application insuffisante de décolorant
•
•
Application excessive de cristal violet et/ou d'iode
•
Frottis épais
•
Apport insuffisant d'eau
Sur-décoloration
Ceci est généralement dû à un réglage incorrect du décolorant. Une application incomplète du
colorant primaire au cristal violet ou du mordant à l'iode entraînera également une sur-
décoloration, mais elle est moins susceptible de se produire. Les causes possibles de sur-
décoloration sont les suivantes:
•
Réglage incorrect du décolorant
Application inadéquate de cristal violet ou d'iode
•
•
Buses obstruées ou sales
Application excessive de cristal violet et/ou d'iode
•
•
Iode dégradée
•
Cultures anciennes ou faibles
Frottis épais ou en agrégats
•
Cultures anciennes ou faible
La plupart des cultures bactériennes se détériorent rapidement après 24 à 48 heures et sont de
plus en plus difficiles à colorer correctement. Utilisez des cultures fraîches (<24 heures) dans la
mesure du possible.
REMARQUE : Vérifiez toujours la performance de la buse de l'instrument avant de procéder à des
ajustements de l'automate (Cf. Section 6). Le réglage des attributs de coloration avant de
rechercher des problèmes mécaniques peut masquer des problèmes de diffusion de réactifs.
RÉSOLUTION DES PROBLÈMES
7.2 Résultats anormaux de coloration
SECTION 7
75