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problème
cause possible
Échantillon coloré recueille
Près du front
Gel de concentration
de tampon
Dégradation
Près du sommet
Gel de concentration
du gel lorsque
le front de la
mémoire tampon
Précipitation
a atteint le fond
A la fois haut et
Gel de concentration
en bas du gel
Suivi de colorant
Pauvre empilage
ne affûter dans une
zone de concentra-
tion dans le gel
d'empilement
Qualité réactif
La préparation des
échantillons
•
p28
remède
Les molécules sont pas suffisamment limité par la taille des
pores de gel de résolution: augmenter le T%.
Les protéines peuvent être dégradées par des protéases
endogènes: utiliser des inhibiteurs de protéase au cours de
la première étape d'isolement.
La taille des pores de gel est trop petit: diminuer la T% de
la résolution (ou l'empilage) de gel.
La protéine a précipité. Chauffer l'échantillon à une tem-
pérature inférieure (70 °C ou moins) pendant 1-2 min.
La plage de poids moléculaire de l'échantillon nécessite un
gradient de concentration d'acrylamide pour régler la gamme
de tailles de protéines.
Versez un plus grand gel de stacking. (Pour de meilleurs
résultats, permettent une hauteur d'empilage-gel de 2,5 fois
la hauteur de l'échantillon dans le puits.)
Éliminer des solutions d'acrylamide obsolètes et utiliser
uniquement le grade le plus élevé d'acrylamide.
Lors de la préparation des échantillons, évitez d'utiliser des
solutions avec des concentrations élevées de sel.
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