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ANA (anticorps antinucléaires), granulocytes pour la détection des ANCA (anti-neutrophil
cytoplasmic antibodies) ou Crithidia luciliae pour la détection d'anticorps anti-ADN natif). Si le
sérum du patient contient des anticorps contre des éléments des tissus ou cellules, ceux-ci se
fixent au substrat correspondant sur la lame lors de la première étape d'incubation. Les
éléments du sérum non fixés sont élíminés par lavage. Les anticorps du patient fixés sont
révélés lors d'une deuxième étape d'incubation par des anticorps anti-immunoglobulines
humaines marqués à la fluorescéine, qui se fixent aux anticorps du patient fixés et les rendent
visibles grâce à leur colorant fluorescent. Il en résulte une fluorescence spécifique verte des
complexes antigène-anticorps, qui deviennent visibles au microscope à immunofluorescence.
3.
PRINCIPE DU TEST
Consulter la Procédure de test du Instructions commun, section 12, pour des instructions
détaillées. Les précisions suivantes se rapportent aux kits ANA HEp-2 :
Temps de contre-coloration : 30 à 90 secondes
Dilution de dépistage recommandée :
o
o
4.
INTERPRÉTATION
d'un patient souffrant d'un carcinome du larynx. Le substrat offre une croissance cellulaire
homogène sans liens cellulaires. Pour l'évaluation des échantillons, les cellules au stade de
mitose sont très importantes, car elles permettent une détermination plus exacte des images
nucléaires. Le titre du sérum est défini par la dernière dilution donnant une fluorescence
positive.
L'évaluation devrait toujours se faire avec un contrôle positif et un contrôle négatif. Les faibles
fluorescences du noyau cellulaire avec des titres de 1:40 (enfants) et 1:80 (adultes) ou un
manque de netteté en ce qui concerne les résultats cliniques doivent être vérifiés à l'aide des
contrôles.
Dans ce cas, il faut collecter des échantillons de patients environ toutes les 6 semaines et les
tester suivant la même procédure.
4.1 Images nucléaires membranaires (membranous nuclear patterns)
4.1.1
Légère fluorescence de la membrane nucléaire (smooth membranous nuclear pattern)
Légère fluorescence homogène de la membrane nucléaire en forme d'anneau dans les cellules
en interphase. Certains échantillons avec de forts anticorps peuvent donner l'impression d'une
coloration de la totalité du noyau. On peut observer un motif similaire dans les cellules en
télophase. En ce qui concerne les cellules en métaphase, cette fluorescence est cependant
diffuse dans le cytoplasme et le matériel chromosomique ne se colore pas.
4.1.2
Image ponctuée de la membrane nucléaire (punctate membranous nuclear pattern)
Fluorescence ponctuée discontinue située le long de la membrane nucléaire. En zoomant à
travers le noyau, la coloration ponctuée peut être observée sur toute la surface du noyau.
Un motif similaire apparaît dans la télophase. Dans les cellules en métaphase, la fluorescence
est diffuse et éparpillée sur le cytoplasme. Certains échantillons avec de forts anticorps
peuvent donner l'impression d'une coloration de la totalité du noyau.
1
Wiik A. Scand J Rheumatol 2005; 34:260-8.
1:80 pour les échantillons d'adultes
1:40 pour les échantillons pédiatriques
Doc. :
Rév. :
Page :
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AESKUSLIDES – ANA-HEp-2 Bulk
005:2018-09-28
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