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PROCEDIMIENTO
Materiales suministrados: Nefelómetro BD PhoenixSpec, adaptador de CA, Kit Calibrador
PhoenixSpec (0,25, 0,5, 1,0 y 4,0 unidades de McFarland) y cuatro pilas alcalinas AA (no
recargables).
Materiales necesarios pero no suministrados: Medios auxiliares de cultivo y equipo necesario
para preparar una suspensión bacteriana.
Instrucciones:
INSTALACIÓN Y SUSTITUCIÓN DE LAS PILAS: Sacar el instrumento y las pilas de la caja de
embalaje. Quitar la tapa del compartimiento de las pilas del fondo del instrumento e instalar las
pilas. La polaridad correcta de las pilas se indica en su soporte. Volver a instalar la tapa del
compartimiento de las pilas.
UTILIZACIÓN DEL ADAPTADOR DE CA: Enchufar la clavija del adaptador en el conector del
instrumento. El adaptador de CA se puede utilizar con o sin las pilas instaladas. El adaptador de
CA no recargará las pilas instaladas.
PROCEDIMIENTO DE CALIBRACIÓN –
Notas:
• El instrumento se debe calibrar cada tres meses, cuando la verificación de calibración diaria de
los calibradores PhoenixSpec de 0,25 y 0,5 tengan una lectura fuera del rango de McFarland de
0,23 - 0,27 y 0,45 - 0,55, respectivamente, o si lo ordena la política o la experiencia del
laboratorio.
• Utilizar sólo el Kit Calibrador PhoenixSpec suministrado para uso con el instrumento
PhoenixSpec.
• Conservar los calibradores PhoenixSpec en el embalaje suministrado para evitar arañar los
tubos, como podría ocurrir en una gradilla portatubos metálica, por ejemplo. Los arañazos o la
suciedad en la superficie de los tubos pueden afectar a las lecturas.
• No utilizar los calibradores PhoenixSpec después de su fecha de caducidad, que figura en la etiqueta.
• El instrumento debe colocarse en una superficie horizontal estacionaria.
• Si aparece un código de error parpadeando en la pantalla de LCD durante el procedimiento,
véase la sección de RESOLUCIÓN DE PROBLEMAS.
• No es necesario agitar los calibradores PhoenixSpec antes de usarlos.
1. Pulsar el botón de encendido
2. Insertar el calibrador PhoenixSpec de 0,25 en la cámara de lectura. Pulsar el botón de
calibración.
3. La pantalla mostrará parpadeando S1 (Standard 1).
4. Pulsar el botón de lectura.
5. La pantalla mostrará parpadeando S2. Quitar el calibrador de 0,25 e insertar el calibrador de
1,0. Pulsar el botón de lectura.
6. La pantalla hará una cuenta atrás a partir de 10, después mostrará intermitentemente S3.
Quitar el calibrador de 1,0, insertar el calibrador de 4,0 y pulsar el botón de lectura.
7. La pantalla hará una cuenta atrás a partir de 10, después volverá a S1. Pulsar el botón de
calibración.
8. Quitar el calibrador de 4,0. La calibración está ahora completa.
Nota: Si se producen errores, véase la sección de RESOLUCIÓN DE PROBLEMAS.
PROCEDIMIENTOS DE ANÁLISIS –
Notas:
• El instrumento debe colocarse en una superficie horizontal estacionaria.
• A diario, los calibradores PhoenixSpec de 0,25 y 0,5 se deben leer como muestras y las lecturas
deben estar entre 0,23 - 0,27 y 0,45 - 0,55 respectivamente. Si alguna de estas lecturas no está
dentro de sus rangos correspondientes, recalibre el instrumento PhoenixSpec.
• No es necesario agitar los calibradores PhoenixSpec antes de usarlos.
1. Pulsar el botón de encendido
2. Agite la muestra tapada y deje que las burbujas se dispersen durante 10 segundos.
3. Levantar la tapa e insertar el tubo.
4. Pulsar el botón de Lectura.
5. Leer la pantalla después de que se apague el símbolo de la bombilla.
6. Quitar el tubo de la cámara de lectura.
7. Ajustar la suspensión de muestra con más organismos si la lectura es inferior a la esperada.
Agitar la muestra en vórtex y volver a leer.
Nota: Véase en el Manual del usuario del sistema BD Phoenix la debida preparación de las
muestras para el sistema BD Phoenix si la lectura supera el intervalo de McFarland esperado o
véase el prospecto del sistema BBL Crystal si la lectura supera el intervalo de McFarland esperado.
8. Repetir el paso 7 hasta alcanzar la densidad de McFarland esperada.
9. Una vez terminado el análisis, pulsar el botón de encendido
RESULTADOS
El instrumento PhoenixSpec presenta las mediciones en unidades de McFarland. Estas unidades
representan la densidad óptica de la suspensión y pueden utilizarse para estimar las UFC/mL de
la suspensión ensayada.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
1. El instrumento PhoenixSpec debe calibrarse con los calibradores PhoenixSpec.
2. Los calibradores PhoenixSpec debe utilizarse únicamente para la calibración del nefelómetro
PhoenixSpec y no como una aproximación manual visual al estándar de sulfato de bario de
McFarland.
3. No utilizar el nefelómetro PhoenixSpec para mediciones fuera del intervalo de 0,1-4,5
unidades de McFarland.
4. No se deben medir en el instrumento volúmenes por debajo de 2,0 mL.
5. Hay que utilizar tubos "L" de BD - 16 mm de diámetro x 75 mm - para las muestras.
6. No utilizar el instrumento bajo la luz solar directa.
CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO
Para determinar la exactitud del nefelómetro PhoenixSpec, se llevaron a cabo recuentos de
colonias en suspensiones de E. coli ATCC 25922 preparadas en suero salino. Cada dilución de
prueba se llevó a cabo en duplicados de seis y la Tabla 1 presenta la media de los recuentos de
las placas.
Tabla 1
McFarland
0,25
0,5
1
2
3
4
*Debido a la dificultad de obtener la densidad exacta de McFarland deseada, estos
resultados se obtuvieron utilizando las lecturas del PhoenixSpec y ajustando las
UFC/mL observadas como si cada dilución hubiera sido la McFarland deseada.
GARANTÍA
El nefelómetro PhoenixSpec está garantizado contra todo defecto durante un año desde la
fecha de adquisición.
MANTENIMIENTO
El mantenimiento general del instrumento PhoenixSpec incluye:
1. Limpiar la parte exterior con una toalla libre de pelusa humedecida con una solución
antibacteriana poco concentrada.
2. Sustituir las pilas cuando sea necesario.
RESOLUCIÓN DE PROBLEMAS
Mensajes de error
E-2
Dos calibradores leídos tenían valores demasiado próximos entre sí (esto es, se
leyó dos veces el mismo calibrador durante el proceso de calibración).
E-3
Error de luz baja; comprobar si el haz luminoso está obstruido.
E-4
Error de memoria. Pulsar el botón de encendido/apagado y si el error se repite,
ponerse con contacto con el servicio técnico.
E-5
Exceso de intervalo A/D. Comprobar si el haz luminoso está obstruido.
E-6
Defecto de intervalo A/D. Comprobar si el haz luminoso está obstruido.
E-7
Fuga luminosa. Comprobar que el tubo esté tapado con una tapa negra. Empujar
el tubo hacia abajo en el pocillo para comprobar que esté completamente
insertado.
E-8
Bombilla estropeada o circuito de la bombilla estropeado. Comuníquese con el
servicio técnico de BD.
Cal?
No use el nefelómetro. Comuníquese con el servicio técnico de BD.
Pila baja
Cambiar las cuatro pilas alcalinas AA cuando el icono
en la parte inferior izquierda de la pantalla.
para encender el instrumento.
La pantalla hará una cuenta atrás a partir de 10.
para encender el instrumento.
8
UFC/mL x 10
esperadas
0,75
1,5
3,0
6,0
9,0
12,0
9
para apagar el instrumento.
8
UFC/mL x 10
ajustadas*
0,9
1,7
3,2
6,1
9,3
12,6
% CV
14,1
13,2
7,4
4,2
3,2
2,7
esté parpadeando
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