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1. INDICATIONS
Le test BIOHIT Active B12 (Holotranscobalamin) est un test immuno-enzymatique (EIA) destiné à la détermination
quantitative de l'holotranscobalamine (HoloTC) dans le sérum humain. L'HoloTC (vitamine B12 liée à la
transcobalamine) est utilisée pour faciliter le diagnostic et le traitement de la carence en vitamine B12.
2. INTRODUCTION
Trois protéines de liaison sont impliquées dans le transport de la vitamine B12 dans l'organisme : le facteur
intrinsèque (FI), la transcobalamine (TC) et l'haptocorrine (HC). Ces protéines garantissent la fixation efficace des
très petites quantités de vitamine B12 d'origine alimentaire. Lorsque la TC et l'HC lient la vitamine B12 les
complexes qui en résultent sont connus sous les noms d'holotranscobalamine (HoloTC) et d'holohaptocorrine
(HoloHC) afin de les distinguer des protéines ne transportant aucune vitamine.
L'HoloHC représente 70 à 90 % de la vitamine B12 présente dans le sang mais elle est biologiquement inerte.
L'HoloTC n'en représente que 10 à 30 % mais elle est la seule forme de vitamine B12 qui puisse être absorbée
par les cellules de l'organisme. Seule la protéine TC transporte la vitamine B12 de son site d'absorption dans
l'iléon vers les tissus et les cellules. La vitamine est alors internalisée sous forme de complexe HoloTC
(vitamine B12 liée à la transcobalamine) via une absorption spécifique médiée par récepteur. Ce processus fournit
la vitamine B12 comme co-enzyme pour les fonctions cellulaires essentielles telles que la synthèse de l'ADN.
Étant donné que l'HoloTC a une demi-vie de circulation plus courte que l'HoloHC, une carence en vitamine B12
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se traduira très probablement d'abord par une diminution du taux sérique de l'HoloTC
.
La mesure de la vitamine B12 sérique totale comporte certaines limites ; en particulier, la majeure partie de la
cobalamine mesurée est liée à l'HC biologiquement inerte. Plusieurs études publiées concluent que l'HoloTC serait
2,3
. Comme l'on pouvait s'y attendre,
un meilleur indicateur du statut de la vitamine B12 que la B12 sérique totale
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les taux d'HoloTC sont faibles chez les patients présentant des signes biochimiques de carence en vitamine B12
.
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Des valeurs peu élevées ont été rapportées chez les végétariens
, les végétaliens
et dans les populations où les
7
. De faibles taux d'HoloTC (mais pas de B12 sérique totale) ont en particulier
apports en vitamine B12 sont faibles
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été observés chez les patients atteints de la maladie d'Alzheimer comparés aux taux du groupe témoin sain
. Les
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taux d'HoloTC reflètent le statut de la vitamine B12, indépendamment de l'absorption récente de la vitamine
.
3. PRINCIPE DU DOSAGE
Les puits de microtitrage sont recouverts d'un anticorps monoclonal très spécifique pour la B12 active
(Holotranscobalamin). Au cours de la première incubation, l'holotranscobalamine du sérum se lie spécifiquement à
la surface recouverte d'anticorps. Durant la deuxième incubation, le conjugué se lie à l'holotranscobalamine
capturée. On lave ensuite les puits pour éliminer les composants non liés. L'holotranscobalamine liée est détectée
par incubation avec le substrat. L'ajout de solution d'arrêt arrête la réaction, ce qui donne un produit fini coloré. La
concentration de l'holotranscobalamine en pmol/L est directement liée à la couleur générée et peut être estimée
par interpolation à partir d'une courbe dose-réponse établie sur la base d'étalons.
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