Table des Matières
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En utilisant les unités
horizontales électrophorèse
sur gel
Préparation des gels d'agarose
Le montant de l'agarose nécessaire pour donner un
gel% des besoins particuliers à calculer, par exemple
un gel de 0,8% peut être obtenue par dissolution
de 0,8 g de poudre d'agarose dans 100 ml de
tampon. Le type de mémoire tampon en cours
d'exécution utilisé doit toujours être la même pour
le gel que celle utilisée dans le réservoir tampon.
L'agarose doit être complètement dissous avant le
gel peut bien se former. Ceci peut être réalisé par
chauffage avec tourbillonnant dans un bain d'eau
ou d'un incubateur réglé à 70 °C ou en chauffant
sur un bloc de chauffage magnétique avec un
barreau d'agitateur magnétique insérée. Le ballon
doit toujours être couverte pour éviter l'évaporation
de la mémoire tampon et un gel de concentration
plus élevée qui en résulte. Ces méthodes peuvent
prendre plus de temps de 1 heure pour l'agarose
pour dissoudre complètement. En variante, l'agarose
peut être dissous dans environ 5-10 minutes en
utilisant un four à micro-ondes. La solution d'agarose
devraient être couverts et le micro-ondes réglé à
basse température. L'agarose dissout mieux si le
micro-ondes est périodiquement arrêté et la solution
tourbillonnait. Avant de couler, la solution d'agarose
doit être vérifiée pour les cristaux d'agarose non
dissoutes qui peuvent affecter les caractéristiques de
mobilité de gels. Si elles sont présentes, l'agarose
dissolution doit être poursuivi. La solution d'agarose
doit être refroidi à 50-60 °C avant de verser. Si
coulé à une température trop chaude, le gel sera
plus susceptibles de fuir et aussi le peigne peut
être déformée.
Électrophorèse sur gel
l'ADN de la mobilité
Fragments d'ADN aussi petites que 1 ko ou moins
peuvent être séparés par électrophorèse sur gel
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