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Correction de fond
La correction de fond à une longueur d'onde bien séparée des pics d'acide nucléique et de
protéine (respectivement 260 et 280 nm) est parfois utilisée pour compenser les effets
d'absorbance du fond. La longueur d'onde utilisée dans ce cas est 320 nm, et elle tolère les
effets de turbidité, l'absorbance élevée des solutions tampon et l'utilisation de cellules à
ouverture réduite. La correction de fond peut également supprimer la variabilité due à la
manipulation de cellules jetables à faible volume.
Les méthodes pour acides nucléiques permettent d'utiliser une correction de fond. Si la
correction de fond est activée, on obtiendra des résultats différents de ceux des mesures
avec correction du fond désactivée, car l'absorbance à 320 nm est soustraite de l'absorbance
à 280 et 230 nm, avant le calcul de la concentration ou des rapports d'absorbance :
A
Concentration = (
260 –
Rapport d'absorbance = (
Rapport d'absorbance = (
Désactiver cette option si le laboratoire n'a jamais utilisé de correction de fond auparavant.
ADN
La procédure est la suivante :
1. Presser la touche 2 pour ouvrir le dossier Sciences de la vie (Lambda Bio+ uniquement).
2. Presser la touche 1 pour ouvrir le dossier Acides nucléiques (Lambda Bio+ uniquement).
3. Presser la touche 1 pour ouvrir la méthode ADN.
L'écran ADN – Paramètres s'affiche.
4. Sélectionner le trajet optique à l'aide des touches fléchées Gauche et Droite, puis
appuyer sur la touche fléchée Bas.
Les options sont 0,5 mm, 5 mm et 10 mm (Lambda Bio), ou 5 mm et 10 mm
(Lambda Bio+).
A
320) × Facteur
A
A
A
260 −
320) / (
280 −
A
A
A
260 −
320) / (
230 −
Méthodes fournies avec l'instrument . 75
A
320)
A
320)
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