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10.3.7 Séchage des barrettes de colonnes
Après l'étape finale de lavage, arrêter le vide (section 9.6). Retirer le support de colonne avec
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les barrettes de colonnes. Pendant ce temps, retirer le couvercle de la chambre à vide et
retirer le récipient à déchets usagé et le remplacer par le récipient à déchets inutilisé (propre).
Insérer le couvercle de la chambre à vide avec le support de colonne et les barrettes de colonnes
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dans le socle de la chambre à vide. S'assurer que la chambre à vide est à nouveau hermétiquement
fermée et que toutes les barrettes de colonnes ou barrettes étanches sont correctement ajustées.
Appliquer le vide maximal (au moins ~400 à ~600 mbar de différence de pression) pendant
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10 minutes pour sécher complètement la membrane.
Éteindre la pompe à vide et libérer le vide.
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!
Cette étape est nécessaire pour éliminer toute trace d'éthanol. L'éthanol contenu dans le tampon W2 inhibe
les réactions enzymatiques et doit être complètement éliminé avant l'élution de l'ADN.
10.3.8 Élution de l'ADN
Pour les étapes d'élution suivantes, la chambre à vide doit être modifiée conformément à la figure 10.
Figure 10 : Installation pour l'élution de l'ADN
Retirer le support de colonne avec les barrettes de colonnes et le placer sur une feuille de
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papier propre (fournie avec le kit).
Retirer le couvercle de la chambre à vide et retirer le récipient à déchets usagé.
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Insérer les adaptateurs « Round-Well Block » surmontés des adaptateurs de «microtube
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rack» dans le socle de la chambre à vide (figure 10).
Placer le rack pour microtubes sur les adaptateurs.
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Placer la quantité appropriée de tubes PCR repérés ou numérotés dans une rangée sur deux
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du rack pour microtubes en commençant par la deuxième rangée du rack pour microtubes.
Fermer la chambre à vide et placer les barrettes de colonnes sur le dessus. Vérifier que les
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barrettes de colonnes se trouvent directement au-dessus d'un microtube PCR pour recueillir
l'ADN élué (figure 11). Revérifier que toutes les barrettes de colonnes et barrettes étanches
sont toujours correctement ajustées dans le support de colonne.
oCheck
Kit d'extraction d'ADN - Instructions d'utilisation
®
Révision 00 / Février 2011
Support de colonne avec
barrettes de colonnes
Couvercle de la
chambre à vide
Rack pour microtubes
Adaptateur „microtube
rack"
Adaptateur „Round-Well
Block"
Socle de la
chambre à vide
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