Table des Matières
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8.3.5
Fixation de l'ADN
Afin d'éviter toute contamination : mettre de nouveaux gants avant cette étape !
Pour chaque échantillon, mettre une colonne dans un tube collecteur.
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Pipeter soigneusement 450 μl des lysats dans la colonne et centrifuger à 11 000 g pendant
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1 minute à température ambiante. Ne pas jeter le reste du lysat !
Jeter le tube collecteur avec le surnageant.
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Afin d'éviter toute contamination : mettre de nouveaux gants avant cette étape !
Préparer de nouveaux tubes collecteurs et mettre les colonnes dans de nouveaux tubes
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collecteurs.
Pipeter le reste des 450 μl de lysat dans la colonne.
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Centrifuger à 11 000 g pendant 1 minute à température ambiante.
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Afin d'éviter toute contamination : mettre de nouveaux gants avant cette étape !
Jeter le tube collecteur avec le surnageant et mettre les colonnes dans de nouveaux tubes
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collecteurs.
8.3.6
Lavage des colonnes
Appliquer 500 μl de tampon W1 dans la colonne.
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Centrifuger à 11 000 g pendant 1 minute à température ambiante.
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Jeter le tube collecteur avec le surnageant et remettre la colonne dans un nouveau tube
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collecteur.
Appliquer 600 μl de tampon W2 dans la colonne.
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Centrifuger à 11 000 g pendant 1 minute à température ambiante.
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Jeter le tube collecteur avec le surnageant et remettre la colonne dans un nouveau tube
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collecteur.
8.3.7
Séchage des colonnes
Centrifuger à 11 000 g pendant 1 minute pour sécher complètement la membrane.
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!
Cette étape est nécessaire pour éliminer toute trace d'éthanol. L'éthanol contenu dans le tampon W2 inhibe
les réactions enzymatiques et doit être complètement éliminé avant l'élution de l'ADN.
oCheck
Kit d'extraction d'ADN - Instructions d'utilisation
®
Révision 00 / Février 2011
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