Table des Matières
Publicité
8.2
Préparation des échantillons
8.2.1
Préparation des échantillons pour PapilloCheck
Les frottis du col de l'utérus qui sont recueillis avec
•
le kit de prélèvement PapilloCheck
•
et le milieu de prélèvement PreservCyt
peuvent être traités directement.
Les frottis du col de l'utérus qui sont recueillis avec
•
le milieu de collecte Surepath
l'emploi : centrifuger 250 μl de l'échantillon pendant 5 minutes à 11 000 g et resuspendre le
culot dans 250 μl d'eau distillée.
Les frottis du col de l'utérus qui sont recueillis avec
•
le milieu de collecte STM
100 μl d'échantillon + 150 μl d'eau distillée.
!
En général, si l'échantillon du frottis du col de l'utérus est très concentré et déjà agrégé, il doit être dilué et
homogénéisé avant le début de l'extraction !
Les échantillons de frottis du col de l'utérus qui sont très dilués et qui ne présentent pas de cellule visible
doivent être concentrés pour obtenir une plus forte concentration de cellules en vue de l'extraction.
Centrifuger jusqu'à 1000 μl d'échantillon pendant 5 minutes à 11 000 g et resuspendre le culot dans 250 μl
d'eau distillée.
Cette étape de concentration ne s'applique que pour les échantillons de frottis du col de l'utérus qui ont été
recueillis à l'aide du kit de collecte PapilloCheck
Surepath
. Si le milieu de collecte STM
TM
Pipeter 250 μl de solution échantillon dans un microtube de 1,5 ou 2 ml. Pour éviter toute
➠
contamination, utiliser des tubes de réaction avec fermeture sécurisée ou fermeture à vis pour
les étapes de lyse. Il est recommandé de valider toute la procédure d'isolation d'ADN de chaque
cycle d'extraction d'ADN à l'aide d'un contrôle négatif d'échantillon.
8.2.2
Préparation des échantillons pour PelvoCheck
Les échantillons d'urine humaine qui sont recueillis avec :
•
le kit de prélèvement PelvoCheck
•
le kit de prélèvement PelvoCheck
peuvent être traités directement.
Pipeter 250 μl de l'échantillon d'urine dans un microtube de 1,5 ou 2 ml. Il est recommandé
➠
d'utiliser des microtubes avec fermeture sécurisée ou fermeture à vis pour les étapes de lyse.
Pour valider l'extraction d'ADN, il faut utiliser un contrôle négatif d'échantillon pour chaque
cycle d'extraction.
Kit d'extraction d'ADN oCheck
- Instructions d'utilisation
®
Révision 00 / Février 2011
(Greiner Bio-One ; réf. 465 070)
®
(Hologic, Bedford, MA, États-Unis)
®
(BD, Franklin Lakes, NJ, États-Unis) doivent être lavés avant
TM
(Qiagen, Hilden, Allemagne) doivent être dilués dans de l'eau distillée :
TM
, du milieu de collecte PreservCyt
®
a été utilisé, une concentration par centrifugation n'est pas possible.
TM
SAFE (Greiner Bio-One ; réf. 453 100)
®
STRAW (Greiner Bio-One ; réf. 453 101)
®
et PapilloCheck
high-risk
®
®
ou du milieu de collecte
®
CT/NG
®
16
Publicité
Table des Matières
