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Tableau 3 : Options de traitement d'échantillons
Le tableau ci-dessous indique les procédures pour différents fluides. Consulter le Manuel des méthodes pour des informations
détaillées. Les méthodes utilisées actuellement dans d'autres Cytocentrifugeuses fonctionnent souvent dans le Cytopro, si le
volume maximum de liquide et le temps d'exécution sont ajustés en conséquence (voir tableau).
Prep.
Echantillons
Hématologie
LCR
e,f
Urine
a,
d,e,f
Synovial
c,d,e,f
Crachat
c, e
Aspirations
a, c,d,e,f
Lavages
a,
d,e,f
Gram
LCR
e,f
Urine
a,
d,e,f
Synovial
c,d,e,f
Crachat
c, e,f
Aspirations
a, c,d,e,f
Lavages
a,
d,e,f
Cytologie
LCR
b,
e,f,g
Urine
a,
d,e,f,g
Synovial
b,c,d,e,f,g
Aspirations
a,b,c,d,e,f,g
Lavages
a,b, d,e,f,g
Pré-fixé
d,e,f,g
Cytopro
a,b,c,d,e,f,g
Magnum
LÉGENDE
Préparation de l'échantillon
a.
Traiter les échantillons sanglants.
1.
Collecter sur anticoagulant.
2.
Lyser les globules rouges.
b.
Si le traitement est retardé, préserver les cellules fragiles.
c.
Traiter les échantillons visqueux si nécessaire.
d.
Retirer les précipités ou débris le cas échéant.
e.
Ajuster le nombre de cellules.
Large (épithélial) 8 000 à 12 000 par échantillon de 0,2 ml
Moyen (urothélial) 16 000 à 24 000 par échantillon de 0,2 ml
Petit (leucocytes) 50 000 à 125 000 par échantillon de 0,2 ml
1.
Concentrer les échantillons de faible cellularité par
précentrifugation.
2.
Diluer les échantillons à haute cellularité avec une
solution saline équilibrée, plus 2 à 4 pour cent de sérum
albumine bovine (BSA).
f.
Ajuster l'environnement de la cellule si nécessaire.
g.
Utiliser des lames traitées pour augmenter l'adhésion
cellulaire.
Cytopad : † Échantillons minces = lent (ocre).
Échantillons épais = rapide (blanc).
Échantillon : 0,1 à 0,3 ml optimal. Des échantillons de moins de
0,1 ml produisent une augmentation du volume de perte de
cellules (0,5 ml max -total de liquide- chambre simple). 0,6 ml
max de fluide total pour la chambre à échantillon double
(2 x 0,3 ml).
1.1 Informations générales sur la Cytocentrifugeuse Cytopro
Type de
Vol
Position de
Cytopad
échantillons
chargement
(ml)*
Ocre
0,2
Puits
Ocre
0,2
Puits
Blanc
0,2
Puits
Blanc
0,2
Puits
Ocre/blanc
0,2
Puits
Ocre/blanc
0,2
Puits
Ocre
0,2
Puits
Ocre
0,2
Puits
Blanc
0,2
Puits
Blanc
0,2
Puits
Ocre/blanc
0,2
Puits
Ocre/blanc
0,2
Puits
Ocre
0,2
Puits
Ocre
0,2
Puits
Ocre
0,2
Puits
Ocre/blanc
0,2
Puits
Ocre/blanc
0,2
Puits
Ocre
0,2
Puits
S.O.
2-6
Puits
Préhumidifier
Fixation
(ml)
(ml)
0-0,1
S.O.
0-0,1
S.O.
0-0,1
S.O.
0-0,1
S.O.
0-0,1
S.O.
0-0,1
S.O.
0-0,1
S.O.
0-0,1
S.O.
0-0,1
S.O.
0-0,1
S.O.
0-0,1
S.O.
0-0,1
S.O.
0-0,1
Facultatif
0-0,1
Facultatif
0-0,1
Facultatif
0-0,1
Facultatif
0-0,1
Facultatif
0-0,1
Facultatif
S.O.
S.O.
Cytopro Magnum : 2 à 6 ml optimal. Diluer les plus petits
échantillons avec un diluant avant cytocentrifugation pour obtenir
au moins 2 ml.
Pré-humidification : † Charger jusqu'à 200 μl de sérum
physiologique équilibré dans le tunnel, (échantillon dans le puits).
Fixation in situ : † Chargez jusqu'à 200 μl d'échantillon dans le
tunnel, 50 à 100 μl de fixateur de type Saccomanno dans le puits à
échantillon.
Vitesse : Haute vitesse pour les petites cellules, basse vitesse pour
les grandes et/ou les cellules fragiles.
Temps : Les échantillons avec débris, viscosité ou cellularité élevés,
demanderont des durées de cycle plus longues.
* 1 goutte d'eau distillée est égale à 20 à 40 μl en fonction de la
pipette utilisée. D'autres liquides peuvent tomber en dehors de
cette fourchette.
** Pour les échantillons dans une solution équilibrée de sérum
physiologique, augmenter le temps jusqu'à 2x pour les échantillons
BSA et les fluides corporels d'origine.
† Chambres de volume standard seulement.
SECTION 1
INTRODUCTION
Vitesse
Temps
Accélération
(tpm)
(min)
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
1000
3-5
Élevé
2000
3-10
Élevé
9
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