8.3 Unité d'illumination par fluorescence OCM 165
Il existe des échantillons qui peuvent être excités à l'aide de faisceaux lumineux et qui
présentent donc un rayonnement (émission) ayant une longueur d'onde différente de
celle des faisceaux d'excitation précédents. L'émission est toujours de plus grande
longueur d'onde que l'excitation (décalage de Stokes). Ce processus est appelé
fluorescence et peut servir de base à une méthode de contraste microscopique. La
façon la plus courante de réaliser cela est d'étendre un microscope optique vertical
avec une unité de lumière incidente de fluorescence.
Principe
Selon l'échantillon, il faut une lumière d'excitation qui doit être contenue dans le spectre
de la source lumineuse (HBO ou LED). Le filtre d'excitation ne laisse passer que la
bande d'ondes correspondante. La lumière d'excitation frappe ensuite un miroir
dichroïque, ce qui la fait réfléchir vers l'objectif et l'échantillon. Après que la lumière
d'excitation a été absorbée par l'échantillon, une lumière de fluorescence (avec une
longueur d'onde plus longue que la lumière d'excitation) est émise. La partie de la
lumière fluorescente qui est émise dans l'objectif peut traverser le miroir dichroïque,
qui empêche également la partie restante de la lumière d'excitation d'atteindre les
oculaires.
Enfin, le filtre de blocage élimine du trajet du faisceau toutes les bandes d'ondes qui
n'appartiennent pas à la fluorescence observée. L'image résultante est donc construite
uniquement par la lumière fluorescente émise par le spécimen.
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