Table des Matières
Publicité
10. PROCÉDURE DE MICROTOMIE
10.1
Procédure
microtomie
1. Insérez le bloc créé à l'aide du système de
cassettes
sectionnables
Paraform dans le mandrin du microtome, à
l'horizontale ou à la verticale selon le type de
cassette. Les cassettes à biopsie au trocart,
à biopsie en surface en forme de tranche et
à orientation doivent être placées à la
verticale dans le mandrin. Commencez à
dégrossir le bloc à 50 µm et réduisez le
réglage au micron une fois que le fond de la
cassette a été retiré. Dégrossissez ensuite le
bloc jusqu'à ce que le tissu soit intégralement
exposé. (les parois de la cassette seront
légèrement visibles pour former un rectangle
autour de l'échantillon).
2. Préparez les blocs pour la microtomie en les
mouillant et/ou les refroidissant (les blocs
traités avec Tissue-Tek Xpress ne doivent
pas être trempés dans l'eau glacée). Les
plateaux réfrigérants Tissue-Tek ou le
module cryo Tissue-Tek TEC Plus peuvent
être utilisés pour refroidir les blocs de
paraffine.
REMARQUE : Utilisez une vieille lame pour
dégrossir tous les blocs, et changez de lame
pour sectionner, ou utilisez une zone d'une
nouvelle lame pour le dégrossissement, puis
faites glisser la lame sur une zone inutilisée de
la lame pour le sectionnage.
3. Sectionnez le bloc jusqu'à obtenir des
rubans (Figure 10A).
de
Tissue-Tek
Figure 10A
4. Poser les sections au-dessus d'un bain-
5. Récupérez les sections et préparez-les au
REMARQUE : L'échantillon peut être encore
légèrement entouré de Paraform. Avec la
cassette à biopsie 13 x 13 mm Paraform, des
morceaux de mousse venant du couvercle
peuvent encore se trouver sur la lame porte-
objets. Cependant, le matériau ne présentera
aucune tache et n'affectera pas l'examen
microscopique.
Page 94
marie.
marquage.
Publicité
Table des Matières
