Déroulement d'une session
Légende :
A-
Intensité du signal pour chaque fluorochrome
B-
Pourcentage de fuite spectrale (cross talk) – La loupe pointe sur le
passage du fluorochrome bleu dans le canal vert.
C-
Vitesse relative d'acquisition
Vous avez le choix entre 3 propositions de configuration :
Fastest :
Cette proposition crée 1 seule track pour l'acquisition de tous les fluorochromes (mode « simultané »).
L'excitation de tous les fluorochromes se fera en même temps. La détection du signal de fluorescence se fera
en même temps pour tous les fluorochromes.
Avantage de cette solution :
Solution la plus rapide.
Inconvénient de cette solution :
Risque important de fuites spectrales. N'utilisez cette solution que si vos fluorochromes sont bien
séparés spectralement.
Best Signal :
Cette proposition crée 1 track pour chaque fluorochrome (mode « séquentiel »). Si vous imagez 3
fluorochromes, cette solution crée une configuration avec 3 tracks. Chaque fluorochrome est excité puis
observé individuellement.
Avantage de cette solution :
Cette solution vous permettra de bénéficier de très bonne séparation spectrale. Réduction au
maximum du risque de fuites spectrales.
Inconvénient de cette solution :
Acquisition longue.
Smartest :
Cette proposition regroupe dans les mêmes tracks, les fluorochromes éloignés spectralement les uns des
autres. Le « Smartest » s'efforce de limiter les fuites spectrales (crée des tracks supplémentaires si les
fluorochromes sont trop proches spectralement) tout en minimisant le temps d'acquisition (regroupe dans
des tracks identiques les fluorochromes éloignées spectralement).
Avantage de cette solution :
Meilleur compromis entre le temps d'acquisition et la qualité du signal recueilli.
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« Fastest »
« Best Signal »
« Smartest »
Service Commun de Microscopie
Manuel d'Utilisation –
Microscope Confocal Zeiss LSM 710 –
Précis
Version 3.1 |