Aspiration des liquides de haute densité
Quand on pipette des liquides ayant une viscosité plus
élevée ou une tension superficielle inférieure à celle de l'eau
(des sérums ou des solvants organiques, par ex.), un film
de liquide se forme sur la paroi intérieure du cône. Ce film
peut générer une erreur. Comme le film reste relativement
constant dans les opérations successives de pipetage
utilisant le même cône, cette erreur peut être éliminée en
formant le film avant de transférer le premier échantillon.
Pour ce faire, aspirez un échantillon et remettez-le dans le
même récipient. Comme le film est à présent formé, tous
les échantillons suivants auront une meilleure exactitude
et une meilleure répétabilité.
Vous devez répéter cette opération de prérinçage si
le volume à aspirer est modifié ou si un nouveau cône est
utilisé.
NOTE : Normalement, le degré d'erreur résultant de liquides
lourds ou visqueux est négligeable si le pipetage est
effectué lentement et soigneusement. Il est très important
de laisser aux liquides le temps de réagir au changement
de pression en maintenant le cône dans sa position pendant
au moins 2 secondes après l'aspiration et l'éjection.
Si, dans des cas extrêmes, cette méthode ne produit pas
de valeurs exactes, recalibrez la pipette conformément au
Chapitre 9.
Après calibrage, il est recommandé d'enregistrer
le recalibrage et la valeur de la correction introduite, pour
faciliter le retour au calibrage correspondant au liquide
standard.
9. Vérification des paramètres de précision
et recalibrage de la pipette
Les pipettes sont calibrées en usine selon la méthode
gravimétrique avec des cônes Corning® et de l'eau distillée,
conformément aux directives ISO 8655 pour le volume
maximal (nominal) de liquide aspiré par la pipette et
pour 10% du volume maximal, selon les valeurs données
(Chapitre 5).
La conception des pipettes permet leur recalibrage et
leur adaptation à d'autres techniques de pipetage ou aux
propriétés des liquides (température, densité et viscosité).
Il est recommandé d'effectuer des contrôles périodiques
du fonctionnement de la pipette au moins une fois par an,
la période de fonctionnement de la pipette sans contrôle
dépend du type de charge de travail (liquides collectés),
et d'autres conditions (intensité de charge et stérilisation
10 – Pipettes Corning Lambda EliteTouch
en autoclave, remplacement d'éléments). Si, quand vous
utilisez la pipette, vous constatez que l'erreur d'exactitude
(différence entre le volume aspiré réel et le volume préréglé)
dépasse la valeur admissible indiquée dans le tableau du
chapitre 5, la procédure de recalibrage doit être effectuée.
Le recalibrage de la pipette consiste à régler sur le compteur la
valeur du volume de liquide obtenue par pesage. Le recalibrage
de la pipette est effectué pour un seul volume de liquide
aspiré par la pipette. Le volume recommandé pour le
recalibrage est 10% de la valeur maximale (nominale).
Conditions de vérification des paramètres de précision
du pipetage
La précision du pipetage est influencée par des facteurs
tels que : cônes utilisés, caractéristiques du liquide pipeté
(densité, viscosité), ou conditions d'utilisation (température
ambiante, pression).
Pour déterminer l'erreur de précision de la pipette,
les conditions suivantes doivent être respectées :
• La température ambiante et la température de la pipette,
des cônes et du liquide, doivent être comprises entre 20°C
et 25°C et stabilisées à ±0,5°C pendant le pesage.
• Les mesures doivent être effectuées avec de l'eau distillée.
• La sensibilité de la balance doit être adaptée au volume
"V" à mesurer :
Volume Contrôlé
(µL)
0,1≤V≤ 10
10≤V≤100
V>100
• Pour le calcul du volume de liquide aspiré par la pipette,
les valeurs du facteur de conversion Z [μL/mg] pour l'eau
distillée ou un liquide de densité comparable, doivent être
prises en compte. Des exemples de valeurs de ce facteur
de conversion sont donnés dans le tableau suivant :
Température
(°C)
95,0
20
1,0028
21
1,0030
22
1,0032
23
1,0034
24
1,0037
25
1,0039
Sensibilité de Balance
(mg)
0,001
0,01
0,1
Pression (kPa)
101,3
105,0
1,0029
1,0029
1,0031
1,0031
1,0033
1,0033
1,0035
1,0036
1,0038
1,0038
1,0040
1,0040
MODE D'EMPLOI – 11