Sommaire des Matières pour Adiagene ADIAVET MM FAST TIME
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MANUEL D’INSTRUCTION ADIAVET™ MM/MI FAST TIME MYCOPLASMA MELEAGRIDIS TEST POUR LA DETECTION DE ET DE MYCOPLASMA IOWEA PAR AMPLIFICATION ENZYMATIQUE DE GENE EN TEMPS REEL (TEST PCR) Référence : ADI601-100 (100 réactions) ADI601-500 (500 réactions) Version française NF601-01 2020/01...
ADIAVET™ MM/MI FAST TIME HISTORIQUE DES REVISIONS .................... 3 INFORMATIONS GENERALES ................. 4 But de l’essai ..............................4 Description et principe du test........................4 MATERIEL ET REACTIFS..................... 5 Réactifs fournis dans le kit ..........................5 Validité et conservation ..........................5 Utilisation du «...
Historique des révisions Non Applicable (première publication) Correction Correction des anomalies du document Modification technique Addition, révision et/ou suppression d’information liée au produit Administratif Modifications non techniques notables pour l’utilisateur NB : toute modification mineure, typographique grammaticale et mise en page, ne figurent pas l’historique des révisions Date Référence...
I. Informations générales 1. But de l’essai Le kit ADIAVET™ MM/MI FAST TIME permet de détecter Mycoplasma meleagridis Mycoplasma iowae par amplification enzymatique en temps réel (PCR) à partir d’écouvillon de volaille, de prélèvement environnemental, de culture bactérienne et de carte FTA. 2.
II. Matériel et réactifs 1. Réactifs fournis dans le kit ADI601-100 A5 ..............solution d’amplification 1 x 1000 µl tube à bouchon vert (Réactif prêt à l’emploi) MM CTL+ ..........contrôle positif M. meleagridis 1 tube à bouchon violet (A reconstituer) MI CTL+ ............
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- Etuve, bain-marie ou bloc chauffant - Vortex - Pipettes de 1 - 10 µl, 20 - 200 µl et 200 - 1000 µl - Embouts Nuclease-free avec filtres pour micropipettes - Microtubes Nuclease-free de 1,5 ml et 2 ml - Tubes stériles de 5, 10 ou 15 ml - Gants latex ou nitrile non poudrés - Ethanol 96-100%...
III. Préconisations avant l’analyse des échantillons Avant de commencer l’essai, lire l’ensemble du protocole et le respecter scrupuleusement. 1. Précautions Adiagène a validé ce test avec les kits d'extraction d'ADN des sociétés Bio-X Diagnostics, Qiagen. D'autres kits d'extraction peuvent être utilisés avec une validation préalable. Respecter les recommandations des fabricants pour la conservation, la préparation et l’utilisation des réactifs contenus dans les kits d’extraction.
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D’autres témoins doivent ou peuvent être ajoutés : Témoin négatif d’extraction (obligatoire) Intégrer au moins un témoin négatif dans chaque série d’extraction pour s’assurer de l’absence d’inter-contamination. Ce témoin pourra être réalisé avec une matrice négative ou du tampon de dilution (par exemple de l’eau physiologique ou du PBS 1X).
IV. Extractions et purifications 1. Extraction avec le kit ADIAPURE™ SLB Se référer à la version de notice disponible sur le site web indiqué sur le certificat d’analyse inclus dans le kit utilisé. 2. Extraction avec le kit ADIAMAG Se référer à la version de notice disponible sur le site web indiqué sur le certificat d’analyse inclus dans le kit utilisé.
NB : Si la chiffonnette a absorbé la totalité du liquide, ajouter 10 ml d'eau peptonée et malaxer à nouveau le sachet Transférer 200 µl de suspension dans un microtube dans un microtube contenant180 µl de tampon ATL et 20 µl de protéinase K. Vortexer. Cf.
V. Amplification a - Déterminer le nombre d’échantillons à analyser, y compris les témoins utilisés (par exemple les témoins positif et négatif d’extraction, les témoins positifs d’amplification (« CTL+ ») et le témoin réactif d’amplification (NTC ou No Template Control)). Nombre final de tubes : n.
VI. Interprétation des résultats 1. Définitions Le terme « ligne de base » ou « base line » correspond au bruit de fond de la fluorescence observé pendant les premiers cycles de l’amplification avant que la fluorescence augmente de façon significative. Le terme «...
a) Validation de l’essai : L’amplification est valide si les résultats suivants ont été obtenus pour les témoins : Témoin positif Témoin positif Témoin Témoin réactif Témoin positif Témoins d’amplification d’amplification négatif (NTC) d’extraction* (MM CTL+) (MI CTL+) d’extraction Amplification FAM Amplification Cy5 Si extraction ADIAPURE SLB...
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