Section 3 : Introduction à la surveillance de l'absorbance
3.1 Principes de fonctionnement
L'absorbance définit dans quelle mesure une lumière incidente est absorbée quand elle passe à travers
un matériau. L'intensité de la lumière diminue de manière exponentielle avec la distance lorsque la
lumière passe à travers le matériau, alors la transmittance peut être déterminée en mesurant l'intensité
de la lumière incidente et de la lumière transmise. La valeur de la transmittance peut ensuite être utilisée
pour calculer l'absorbance de l'échantillon.
La loi de Beer-Lambert indique de quelle manière l'absorbance est liée à la concentration et la distance
que la lumière doit parcourir à travers l'échantillon (longueur de trajectoire) :
Où A est l'absorbance, ε est le coefficient d'extinction, c est la concentration de la solution (en mol/L) et l
est la longueur de trajectoire parcourue par la lumière à travers l'échantillon (en cm).
3.2 Absorbance basée sur une DEL
Les photomètres basés sur une diode électroluminescente (DEL) sont parfaits pour les mesures
qualitatives. En outre, grâce à l'utilisation de références d'étalonnage et au contrôle des paramètres
environnementaux, un photomètre basé sur une DEL est capable de déterminer quantitativement la
concentration de l'analyte. Lors de la réalisation de mesures quantitatives, il est essentiel que le
photomètre basé sur une DEL soit correctement mis en corrélation avec les solutions et méthodes de
laboratoire standard.
La DEL fournit une plage de longueur d'onde spécifique (ou de longueurs d'onde spécifiques pour les
modèles à deux canaux) pour la mesure, sélectionnée pour correspondre à l'absorption moléculaire
spécifique de l'analyte. La DEL est située à l'intérieur du photomètre et est spécifique à l'application. Par
conséquent, le photomètre UV-VIS-NIR est un instrument dédié à la surveillance de seulement ou deux
analytes spécifiques.
Ci-dessous se trouvent trois exemples de graphiques de profils de spectre de DEL, pour des longueurs
d'onde de source de lumière DEL typiques 260/280/880 nm (Figures 1-3).
Définitions
•
CWL (longueur d'onde centrale) : la longueur d'onde d'une source optique considérée comme
étant au milieu. La longueur d'onde du pic de la courbe de densité spectrale.
o Attention : si vous tentez de réaliser des mesures sur l'épaule/la pente du profil
d'absorption de la molécule, la mesure de l'absorption peut changer radicalement avec
une différence de quelques nanomètres. L'absorption ne peut jamais saturer car une
partie de la sortie de la DEL se situe hors du profil d'absorption de la molécule. D'infimes
variations de l'absorption existent entre les photomètres en raison de la tolérance liée à
la CWL.
Manuel utilisation du photomètre UV-VIS-NIR
PendoTECH destiné aux mesures de turbidité et d'absorption des UV
A= εcl
Révision 3
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