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Introduction
Description générale
L'analyseur Seahorse XF HS Mini mesure le taux de modification du pH et de l'oxygène dissous
dans le milieu en contact immédiat avec des cellules en culture dans une miniplaque.
Les modifications du milieu extracellulaire sont dues à la consommation des cellules ou à la
production d'analytes. La mesure sensible du flux de milieu peut être utilisée pour déterminer
le taux de métabolisme cellulaire avec précision et de manière non-invasive, sans marqueur.
L'une des caractéristiques uniques de la technologie XF est sa capacité à effectuer des mesures
précises et reproductibles en cinq minutes à peine. Pour cela, il suffit d'isoler un très petit volume
(environ 2 µL) de milieu au-dessus de la monocouche cellulaire. Le métabolisme cellulaire
provoque des modifications rapides du microenvironnement, lesquelles sont facilement
mesurées dans ce petit volume.
Un cycle de mesure prend six minutes. Le milieu est mélangé doucement et la concentration
d'analytes est ensuite mesurée jusqu'à ce que la concentration d'oxygène baisse d'environ 20 à
30 %, et que le pH du milieu diminue d'environ 0,1 à 0,2 unités de pH. La mesure est réalisée à
l'aide de biocapteurs optiques détecteurs de fluorescence intégrés dans une cartouche jetable.
La cartouche est placée dans une miniplaque de culture cellulaire à 8 puits.
Les taux métaboliques de base sont typiquement mesurés trois ou quatre fois, puis rapportés
en pmol/min pour le taux de consommation d'oxygène (OCR) et en mpH/min pour le taux
d'acidification extracellulaire (ECAR). Le composé est ensuite ajouté au milieu et mélangé,
puis l'OCR et l'ECAR post-traitement sont mesurés plusieurs fois. Lorsque les cellules changent
de voie métabolique, la relation entre l'OCR et l'ECAR est modifiée.
L'analyseur Seahorse XF HS Mini comporte :
•
Un analyseur pour paillasse
•
Un capteur/composé jetable
•
Des cartouches d'administration
•
Des miniplaques traitées pour culture tissulaire afin d'ensemencer les cellules à analyser
•
Une solution d'étalonnage
•
Le logiciel Seahorse Analytics pour le traitement des données XF
Les consommables sont vendus séparément et comprennent des FluxPaks (cartouches de
capteurs, plaques pour cellules et étalon) ainsi que différents kits de test, réactifs et milieux.
Les miniplaques Seahorse XFp et XF HS sont compatibles avec l'analyseur Seahorse XF HS Mini.
Les miniplaques Seahorse XF et les cartouches de capteurs sont exclusivement disponibles
chez Agilent.
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Manuel d'utilisation de l'analyseur de flux extracellulaire Seahorse XF HS Mini
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