Table des Matières
Publicité
Notes, des tampons,
|et des volumes
Notes d'électrophorèse sur gel d'agarose
Électrophorèse sur gel peut être utilisé pour
des fragments d'ADN séparés aussi petites que
0,1 kb ou moins. Des gels de polyacrylamide
sont généralement utilisés pour des fragments
plus petits que 1 kb.
ADN de mobilité
Suggestion d'agarose de concentration pour
séparer des fragments de différentes tailles est
donnée dans le tableau 2 ci-dessous. D'autres
facteurs affectant les résultats de séparation
comprennent le tampon en cours d'exécution,
réglage de la tension, la température, la confor-
mation et la présence de bromure d'éthidium.
Agaroses spéciales sont disponibles qui peut
s'étendre gammes de résolution.
Une norme commune est un Hind III digest
du phage lambda, ce qui donne huit fragments
d'une taille allant de 0,1 à 23 paires kb. Pour
une bonne résolution, exécutez 45 minutes sur
un 10 cm de long, 1% gel d'agarose TBE 0.5X
gel à 150 V.
Tableau 2: concentrations d'agarose des fragments
d'ADN de séparation de différentes tailles
agarose (%)
0,5
0,7
1,0
1,2
1,5
*Current Protocols in Molecular Biology, p 2.5.2 (1993)
portée effective de la résolution
de fragments d'ADN linéaires* (kb)
1,0–30
0,8–12
0,5–10
0,4–7
0,2–3
p11
•
Publicité
Table des Matières
