Table des Matières
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Préparation du
formamide
Désionisation et stockage du formamide
A propos du
formamide : Agent
dénaturant
Problèmes liés au
formamide
commercial
Le formamide permet de dénaturer les échantillons d'ADN avant qu'ils ne soient
placés sur l'Analyseur génétique 3100 ABI P
IMPORTANT Un formamide de haute qualité est essentiel pour des données reproductibles.
Le formamide acheté auprès de fournisseurs commerciaux est souvent contaminé par
des quantités d'eau variables et des ions organiques et inorganiques indésirables. De
plus, le formamide est souvent fourni en bouteilles de verre qui exposent le formamide
à l'air une fois ouvertes et lui laissent absorber l'eau.
L'eau réagit lentement avec le formamide pour produire de l'acide formique (acide
méthanoïque) et de l'ammoniac. Les produits ioniques de cette réaction entraînent
deux problèmes :
ils entrent sensiblement en concurrence avec les ions d'ADN pour l'injection dans
le capillaire, entraînant des signaux affaiblis.
ils réagissent avec l'ADN, entraînant une dégradation de l'échantillon.
La figure ci-dessous montre l'effet des produits ioniques résultant du formamide sur
l'injection électrocinétique.
Echantillons préparés avec du
formamide désionisé de haute qualité
A
®
.
RISM
Echantillons préparés avec
du formamide commercial
Préparation du formamide A-1
A
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