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Principes théoriques
11.
Principes théoriques
11.1
Valeurs de référence
La concentration physiologique de l'hémoglobine est propre à l'âge et au
i,ii
sexe
.
Femmes : 110 – 160 g/L
Hommes : 130 – 180 g/L
Enfants après période nourrissons : 100 – 140 g/L,
Les plus hautes concentrations Hb sont mesurées chez les nourrissons.
11.2
Description de la méthode de mesure
11.2.1 Réaction dans la microcuvette
Dans la microcuvette, une forme modifiée de la méthode azoture-
méthémoglobine de Vanzetti est utilisée
Pour utiliser la méthode azoture-méthémoglobine dans du sang non
dilué, trois réactifs sont nécessaires :
Le désoxycholate de sodium dissout et disperse les membranes
cellulaires des globules rouges contenus dans le sang. L'hémoglobine
contenue dans les érythrocytes est désormais libérée dans la solution.
Le fer bivalent de l'oxyhémoglobine et de la désoxyhémoglobine est
oxydé par le nitrite de sodium en fer trivalent, puis en méthémoglobine.
La méthémoglobine et les ions azoture existants et formés à partir de
l'azoture de sodium forment un complexe coloré d'une capacité
maximale d'absorption à 540 et 575 nm et pouvant être quantitativement
déterminé par photométrie.
11.2.2 Principe de mesure par photométrie
Le photomètre Hemo Control mesure l'absorption de la lumière émise.
L'utilisation de microcuvettes et d'ondes lumineuses courtes permet
l'analyse de sang non dilué.
La lumière d'une longueur d'onde définie avec ou sans analyte est
dirigée vers un photo-détecteur et l'absorption A est déterminée. Pour
i
H. Greiling, A. Gressner, eds., Lehrbuch der Klinischen Chemie und Pathobiochemie,
[Textbook
of
Verlagsgesellschaft, Stuttgart, 3. Auflage, 1995, S. 521, 818-819
ii
Lothar Thomas, ed., Labor und Diagnose Indikation und Bewertung von Laborbefunden
für die medizinische Diagnostik [Laboratory and diagnostic indications and assessment of
laboratory findings for clinical investigation], TH-Books Verlagsgesellschaft mbH,
Frankfurt/Main, 5. Auflage, 1998, S. 485, 488
iii
G. Vanzetti, An azide-methemoglobin method for hemoglobin determination in blood,
Am. J. Lab. & Clin. Med. 67 (1966) 116
34
Clinical
Chemistry
Manuel d'utilisation Hemo Control
iii
.
and
Pathobiochemistry]
F.
K.
Schattauer
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