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Spectrophotométrie
Spectrophotomètre CCD 2
Réf :701 606
2.2.3 Beer-Lambert
La loi de Beer-Lambert est souvent utilisée pour déterminer la concentration d'une solution
inconnue.
Pour toute expérience dans cet onglet, il est indispensable de laisser la source
lumineuse allumée durant 20 minutes avant toute acquisition. En effet, vous allez avoir
besoin d'une source stabilisée afin de comparer les absorbances, à une longueur d'onde
donnée et pour différentes concentrations. L'expérience peut durer quelques minutes.
LA SOURCE DOIT ÊTRE STABLE.
Rappels :
La loi de Beer-Lambert permet de mettre en évidence la proportionnalité entre l'absorbance
d'une solution pour une longueur d'onde choisie et la concentration de cette solution.
Cette loi est régie par la relation suivante :
Où :
l : la longueur du trajet optique en cm
c : la concentration en mol.L-
Limites d'application :
La loi de Beer-Lambert est valide pour des solutions diluées. Lorsque la concentration des
solutions à mesurer est trop élevée, les propriétés des molécules évoluent.
Par ailleurs, le spectrophotomètre CCD2 est calibré pour permettre les mesures
d'absorbance entre 0 et 2,5 Abs.
Expérience :
La première étape est de calibrer l'appareil. Pour cela, il est conseillé de maintenir
l'ajustement automatique du temps d'intégration.
Positionner votre cuve remplie de solvant pour la mesure du spectre de référence.
Vérifier qu'aucun filtre n'est placé dans le porte-cuve.
À noter : l'appareil procède également à la mesure de noir pour éviter la prise en compte
du bruit optique pouvant perturber la mesure.
Choisir une longueur d'onde de travail. Cette longueur d'onde peut être choisie
arbitrairement ou en fonction d'une expérience d'absorbance qui aura permis de
déterminer la longueur d'onde pour laquelle l'absorbance de la solution est maximale.
Choisir, ensuite, le nom de la grandeur à positionner en abscisse et son unité. En général,
la variable est la concentration. Son unité est le mol.L
variable (la température par exemple) ou une autre unité mmol.L
Positionner dans le porte-cuve, tour à tour, les cuves de solution dont la concentration est
connue. Entrer, pour chaque solution, la valeur de la variable X connue.
Lorsque toutes les mesures d'absorbance de vos solutions connues sont réalisées, tracer
la droite d'étalonnage.
Positionner alors la cuve contenant une solution de concentration inconnue et déterminer
son absorbance. En déduire sa concentration.
À noter : en cliquant sur le bouton « mesure », afficher l'absorbance et la concentration
en un clic !
FRANÇAIS
est le coefficient d'extinction molaire (en m
1
3
-1
-1
.mol
.cm
)
-1
. Mais vous pouvez choisir une autre
8
-1
par exemple.
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