it
Premessa basilare è che lo
strumento da analizzare pos-
sa essere sottoposto a la-
vaggio.
Attenersi alle indicazioni del-
la casa produttrice in base
alla norma EN ISO 17664.
Metodo
L'applicazione di questo meto-
do semiquantitativo è descritto
anche nell'appendice C della
norma EN ISO 15883-1.
A contatto con il reagente A, le
proteine formano un complesso
2+
chelato Cu
(reazione del biu-
reto).
Successivamente il Cu
ridotto con il reagente B a Cu
che associato al reagente C for-
ma un complesso di colore vio-
letto (metodo BCA). La concen-
trazione del colore è inversa-
mente proporzionale alla con-
centrazione di proteine.
Reagenti
Il reagente A è disponibile in 48
singole dosi. Per ogni campione
si utilizza una boccetta.
Il kit test può essere conserva-
to, chiuso, a temperatura am-
biente (15-30°C). Utilizzarlo en-
tro la data di scadenza indicata
sulla confezione.
Influssi della temperatura più
elevati (fino a ca. 50°C) e limitati
nel tempo (< 3 mesi) non costi-
tuiscono un problema.
Temperature inferiori (<10°C)
possono causare la cristallizza-
zione della soluzione di risciac-
quo (SDS, 5 volte concentrata).
Quindi utilizzare la soluzione
solo dopo aver fatto sciogliere i
cristalli, sottoponendoli a fonti di
calore.
Conditions préalables : l'ins-
trument doit pouvoir être
lavé ! Les données du fabri-
cant suivant la norme EN
ISO 17664 doivent être res-
pectées.
Méthode
L'utilisation de cette méthode
semi-quantitative est décrite
dans l'annexe C de la norme
EN ISO 15883-1.
Les protéines réagissent avec
le réactif A et forment un
complexe chélaté Cu
Ensuite, le cuivre superflu Cu
est réduit à Cu
lacé avec le réactif C (méthode
2+
viene
BCA). Sa concentration est in-
+
versement proportionnelle à la
,
concentration de protéines.
Réactifs
Il y a 48 doses de réactif A.
On utilise un flacon par analyse.
Le kit de test peut être conservé
à température ambiante
(15-30°C) jusqu'à la date in-
diquée sur le paquet s'il est fer-
mé.
Les augmentations de tempéra-
ture (jusqu'à environ 50°C) limi-
tées dans le temps (moins de
trois mois) ne posent pas de
problèmes.
Les températures basses
(<10°C) peuvent provoquer la
cristallisation de la solution de
lavage (SDS, concentration 5x).
Pour utiliser la solution, il faut
préalablement la réchauffer
pour dissoudre les cristaux.
fr
Methode
Het gebruik van deze
semi-kwantitatieve methode is
ook in bijlage C van de norm
EN ISO 15883-1 beschreven.
Proteïnen reageren met reagens
2+
-protéine
A waardoor een Cu
2+
+
ne-chelaat-complex ontstaat
qui devient vio-
(biureet-reactie).
Aansluitend wordt met reagens
B overtollig Cu
duceerd dat met reagens C een
paarskleurig complex vormt
(BCA-methode). De concentra-
tie hiervan is omgekeerd even-
redig aan de proteïneconcen-
tratie.
Reagentia
Reagens A wordt in 48 flesjes
geleverd. Voor elke meting ge-
bruikt u één flesje.
De test-kit dient afgesloten op
kamertemperatuur (15-30°C) te
worden bewaard en is te ge-
bruiken tot de datum die op de
verpakking vermeld staat.
Tijdelijk (< 3 maanden) is een
hogere temperatuur (tot ca.
50°C) geen probleem.
Lage temperaturen (<10°C)
kunnen kristallisatie van de
spoeloplossing (SDS, als 5-vou-
dig concentraat) tot gevolg
hebben. Gebruik een dergelijke
oplossing alleen als de kristal-
len weer zijn opgelost. Verwarm
daartoe de oplossing.
nl
Controleer of het te onder-
zoeken instrument mag wor-
den gereinigd. Houdt u zich
aan de aanwijzingen van de
fabrikant van het instrument
(volgens de norm
EN ISO 17664)!
2+
-proteï-
2+
tot Cu
+
gere-
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