Caractéristiques Importantes Du Système; Le Microscope; Les Objectifs - Leica TCS SP5 Manuel D'utilisation

2 – Caractéristiques importantes du système

2-1 Le microscope

Le microscope confocal Leica de type SP5-AOBS est installé sur un microscope inversé DMI6000 entière-
ment motorisé et piloté par informatique.

2-1-1 Les objectifs

10x / 0,30 HCX PL FLUOTAR Dry (11506505)
–
Sans immersion
–
Dist. de travail : 11,0mm
–
Champ maximal : 1550x1550µm (confocal)
–
Longueur d'onde
d'excitation
405nm
458nm
476nm
488nm
496nm
514nm
561nm
633nm
 cette valeur diffère légèrement de la résolution xy maximale théorique de 0,46λex/NA mais est plus proche d'une valeur réelle (trou d'aiguille=1AU).
 une des formulation de la résolution maximale théorique en z.
–
20x / 0,70 PL APO
(11506514)
Lamelle couvre objet 0,17mm obligatoire
–
→ immersion à huile (
–
d'une montre
→ immersion glycérol (
–
d'une montre
→ immersion à eau (
–
) – Dist. de travail : 0,26mm
montre
Champ maximal : 775x775µm (confocal)
–
Longueur d'onde
d'excitation
405nm
458nm
476nm
488nm
496nm
514nm
561nm
633nm
Soit des résolutions 2,3 fois meilleures que celles du 10x !
Résolution xy max.
1AU
r ≈ 0,5λex / NA 
675nm
763nm
793nm
813nm
827nm
857nm
935nm
1,055µm
Multi-imm (oil-glyc-coveg:0,17-w(water salted)-0(water)
bague tournée au max dans le sens inverse des aiguilles
) – Dist. de travail : 0,17mm
bague légèrement tournée dans le sens des aiguilles
) – Dist. de travail ~ 0,20mm
bague tournée au max dans le sens des aiguilles d'une
Résolution xy max.
1AU
r ≈ 0,5λex / NA
289nm
327nm
340nm
349nm
354nm
367nm
401nm
452nm
Taille optimale du pixel
293nm
332nm
345nm
353nm
360nm
373nm
407nm
459nm
Taille optimale du pixel
126nm
142nm
148nm
152nm
154nm
156nm
174nm
196nm
3
Résolution z max.
1AU
r ≈ 2λex / NA² 
9,00µm
10,17µm
10,57µm
10,85µm
11,03µm
11,44µm
12,48µm
14,08µm
Résolution z max.
1AU
r ≈ 2λex / NA²
1,66µm
1,87µm
1,94µm
1,98µm
2,03µm
2,10µm
2,28µm
2,59µm
Pas d'échantillonnage
optimale en z
3,91µm
4,42µm
4,59µm
4,72µm
4,80µm
4,97µm
5,42µm
6,12µm
Pas d'échantillonnage
optimale en z
721nm
813nm
840nm
864nm
882nm
913nm
994nm
1,12µm